文档介绍：华东师范大学
硕士学位论文
基于Ru(bpy)<,3><'2+>的电致化学发光生物传感器的研制
姓名:董平
申请学位级别:硕士
专业:分析化学
指导教师:方禹之;何品刚
20100401
基于墓滔嗟缰禄Х⒐馍锎ǜ衅鞯难兄摘要已经在药物诊断、新药筛选、蛋白质分析、生物传感器和分子开关研制领域成为有着广泛应用前景的识别元件。将穹玡胗ü狻⒒Х⒐夂兔腹艿缬镜燃觳夥椒S每第一章核酸适配体且恢帜芴匾煨缘亟岷先缧》肿印⒌鞍字噬踔潦窍赴饶勘晡的单链巍S氪车目固逑啾冉希琣在对分析物检测上具有化学稳定性高、实用性强、基团修饰简便以及在生物传感器设计上能高度适应兼容。近十年来,分别实现对原癌蛋白血小板源性生长因子、可卡因和榷嘀治镏实牧槊艏觳狻=敫髦址治黾际趿S美词迪侄蕴囟ㄐ蛄蠨、蛋白、酶及生物活性小分子的检测将对功能基因组、蛋白质组、癌症诊断研究起到至关重要的作用。电致化学发光窃诨Х⒐獾幕∩戏⒄蛊鹄吹囊恢中碌姆治龇椒ǎ腔学发光与电化学互相渗透的产物,这种方法不但可以利用电化学分析的特长,而且可以发挥化学发光分析的优点,具有高灵敏度、高选择性、操作快速简便和仪器简单等特点,已成为分析领域,尤其是生物分析领域工作者感兴趣的重要课题。作为电致化学发光试剂,已经广泛被应用于传统液相逑抵校捎谄浼鄹癜汗螅识绾成功有效地将其固定到电极上制成固相电致化学发光传感器以减少试剂消耗就显得尤为重要。壳聚糖是由甲壳素经脱乙酰基过程制备的一种富含氨基的多聚糖,在自然界中含量十分丰富。由于壳聚糖具有良好的生物相溶性、生物可降解性,可成膜性及高效的生物活性等特点,现已广泛应用到医药、化工、饲料、农业、环保和生物技术等各个领域。近年来,壳聚糖作为一种优良的膜材料,也越来越受到人们的重视。当壳聚糖溶液的值小于时呈现可溶状态,当值大于时,此时壳聚糖形成凝胶状,故而可通过对值的调控将壳聚糖膜制成特殊的固定化载体。本论文将生物分子识别元件与电致化学发光技术的高灵敏度特性相结合,构建具有高选择性的新型固相电致化学发光生物传感器,实现对凝血酶的检测。此外,还利用壳聚糖膜的特征,将≡裥缘氐绯粱降缂希7⒘艘恢秩碌腞效固定方法。本论文主要内容如下:绪论本章简要介绍了电致化学发光治龇椒ǖ母拍睢⒃砗吞氐悖约案髦諩·’
阵列电极上选择性固定的固相电致化学发光传感器构建本章基于将包裹三一,联吡啶墓枘擅卓帕证明了能有效将选择性固定到阵列电极上的可能性,而且能多通道选择性固第二章基于二茂铁标记分子灯塔适配体的固相ǜ衅魇迪侄阅C傅募觳第三章基于无标记适配体和分子灯塔构型变换的固相ǜ衅魇迪侄阅C傅募的构象变化,通过检测前后的藕疟浠炊糠从衬勘甑鞍住!DC傅暮俊=反应类型及其在分析化学中的应用,展望了治龅奈蠢捶⒄骨熬啊=樯芰薉与核酸适配体生物传感器的构造原理、分类特点和分析应用。介绍了壳聚糖的理化特性、壳聚糖膜的优势及其在生物技术方面的应用。最后阐述了本论文的目的和意义,指出论文的创新之处。本章利用标记有二茂铁的核酸适配体,结合分子灯塔特殊茎环结构,构建了全新的固相电致化学发光锎ǜ衅鳎⒍阅C赋晒κ迪旨觳狻U庵痔厥饨峁沟生物传感器包含了⒐饣滓约癊信号开关两部分。金胶钌混聚物ü鼳甋键固定到金电极上构成⒐饣祝昙怯卸姆肿拥扑配体则作为藕趴9兀浠凡坑赡芄挥肽C阜⑸匾煨越岷系囊欢翁厥庑蛄泄成。当凝血酶与核酸适配体发生反应时,分子灯塔的茎部打开,此时标记在一端的远离发光基底,对的猝灭作用降低,⒐层上,当肽C阜从螅チ捶肿拥扑鼗罚私咏⒐獠悖珽信号猝灭。利用前后两次藕疟浠阅C傅呐ǘ冉卸坎舛ā4舜ǜ衅骶哂懈灵敏度和高选择性。第四章/壳聚糖复合膜电沉积到电极表面这一原理,开发了一种有效将选择性固定在目标电极上的方法,即将选择性固定到阵列电极的任意电极上。实验结果不仅定不同的复合膜。故而此方法在生物分析、毛细管电泳和药物筛选上都有很重要的应用前景。实验采用紫外可见光谱、场发射扫描电子显微镜甋屯干涞缱酉晕⒕来表征约案春夏ぁ;诟春夏ば奘蔚缂ǖ牡缰禄Х⒐獯ǜ衅鞫匀的检测呈现良好的重现性、稳定性和灵敏度。
关键词电致化学发光固相生物传感器,核酸适配体,分子灯塔,凝血酶,猝灭作用,壳聚糖,选择性固定
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