文档介绍:读书报告-骨髓间充质干细胞(MSCs)
生物学特性及其临床应用
汇报人:常惠
航空航天生理学教研室
巨噬细胞
成纤维细胞
脂肪细胞
骨祖细胞
骨髓 Mesenchymal stem cells
内皮细胞(MSCs)
网状细胞
造血干细胞
内皮祖细胞
1 发现、分离和特征
2 表面标志物
3 分化
4 免疫学特征
5 治疗应用
1-1. MSCs发现
骨髓中非造血干细胞的存在首先被130年
前的德国病理学家Cohnheim发现并提出。
Friedenstein的工作(1966)首先证实骨髓
中的细胞可以分化成为其它干细胞。
二十世纪八十年代其它工作小组研究确定
了Friedenstein方法,分离的细胞具有多向分
化潜能,可以分化成为各种结缔组织细胞:
成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞甚至肌原细
胞。所以MSCs也被称为间充质细胞或骨髓
基质细胞。
1-2 MSCs的分离
人MSCs是在骨髓经密度梯度离心后的单
核细胞层中分离出来的,单核细胞在10%胎
牛血清中培养,MSCs贴壁。
现在MSCs可以从骨髓以外的不同部位:
脂肪组织、羊水、骨膜、骨小梁、滑膜、
乳牙及胚胎组织分离出来,并呈现表型不
均一性。
MSCs也可以从妊娠期三个月、六个月的
胚胎血液、肝脏、脾脏和骨髓中获得,虽然
表型相似,但是培养扩增的MSCs呈现分化潜
能的不均一性,这主要取决于组织来源。
MSCs可以从很多物种包括小鼠、大鼠、猫、
狗、兔子、猪和狒狒中分离出来,但是成功
率不尽相同,例如移去小鼠的造血细胞是很
困难的。
通过扩增和传代MSCs可以纯化细胞,培
养结果仍会存在形态不均一性,包括长的纺
锤形、大的多边形细胞,形成汇合后还会存
在一些小的立方细胞。
成年人的MSCs都是从骨盆髂骨中抽吸获
得,也可以从胫骨和股骨骨腔,胸椎、腰椎
中获得。大型动物MSCs都是从固定的部位
获得,如啮齿类都是从股骨和胫骨的中骨干
中获取。常规细胞培养技术可以扩增MSCs。
形态学呈现成纤维细胞样,原代培养持续
12-16d,这段时间可以去除造血干细胞。