文档介绍：分类号学号 D200877668
学校代码 10487 密级
博士学位论文
以磁珠为载体的电化学免疫传感器
学位申请人:李芳
学科专业:环境工程
指导教师:肖波教授
胡涌刚教授
答辩日期:
A Dissertation Submitted in Fulfillment of the Requirements for the
Degree of Doctor of philosophy in Engineering
ic beads-based electrochemical
Immunosensor
Candidate : Li Fang
Major : Environmental Engineering
Supervisor : Prof. Xiao Bo
Prof. Hu Yonggang
Huazhong University of Science and Technology
Wuhan 430074, P. R. China
May, 2012
独创性声明
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的研究成果。尽我所知,除文中已经标明引用的内容外,本论文不包含任何其他
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日期: 年月日
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本论文属于
不保密□。
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学位论文作者签名: 指导教师签名:
日期: 年月日日期: 年月日
华中科技大学博士学位论文
摘要
以磁珠为载体的电化学免疫传感技术是当前的一个研究热点。如何有效地将携
带了大量检测信息的磁珠固定在工作电极的检测表面,并对其进行直接电化学测定
是制约该技术发展的一个关键性问题。使用磁性工作电极可有效解决此困难。本论
文将围绕磁性工作电极的制作,基于纳米信号放大的以磁珠为载体的电化学免疫检
测新方法的构建及其在动物疾病诊断中的应用,开展以下几方面的工作:
(1)磁性工作电极的制作
分别建立了磁性金工作电极和磁性玻碳电极的制作方法,且制作方法简单、易
行,成本低廉,易于推广。此外,我们对磁性工作电极的性能进行了测试,结果表
明,它们能有效捕获磁珠进行直接电化学测定,为构建以磁珠为载体的电化学免疫
分析新方法奠定了基础。
(2)基于碳纳米管掺杂以磁珠为载体的电化学免疫新方法在日本乙型脑炎病毒
检测中的应用
以磁珠为载体,掺杂碳纳米管构建了一种新的电化学免疫分析方法,并将其应
用于日本乙型脑炎病毒的检测中。选用金磁纳米粒子为载体,辣根过氧化物酶为示
踪标记物。免疫反应后,掺杂碳纳米管。利用磁性金工作电极将碳纳米管掺杂的金
磁复合物捕获到电极检测表面上进行电化学测定。掺杂碳纳米管可有效改善电极表
面的导电性,得到高灵敏的检测结果。采用日本乙型脑炎病毒作为目标分析物。在
最佳检测条件下,日本乙型脑炎病毒的检测限为 ×103 PFU/mL,比胶体金免疫试
纸条法低两个数量级,与 RT-PCR 法的基本类似。分别用本方法和 RT-PCR 法分析
60 份临床样品,结果显示本方法与 RT-PCR 法的符合率高达 95%,表明本方法在日
本乙型脑炎病毒的临床诊断中具有较好的应用前景。
(3)基于纳米金标记的以磁珠为载体的电化学免疫新方法在伪狂犬病毒抗体检
测中的应用
采用纳米金为电活性探针,构建了一种新的以磁珠为载体的电化学免疫分析方
法,并将其应用到伪狂犬病毒抗体的检测中。选用羧基修饰的磁珠为载体。免疫反
IV
华中科技大学博士学位论文
应后,利用磁性玻碳电极将磁珠捕获到电极检测表面上,采用电化学氧化法使得纳
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米金生成 AuCl4 ,通过测定 AuCl4 的信号对检测物进行分析。采用伪狂犬病毒抗体
作为