文档介绍：实验室常用溶液的配制
%丙烯酰***溶液(100ml)
【配制方法】将29g丙烯酰***和1g N,N'-亚甲双丙烯酰***溶于总体积为60ml的蒸馏水中。加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器()过滤除菌,,置棕色瓶中保存于4℃温度。
【注意】丙烯酰***具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。称量丙烯酰***和亚甲双丙烯酰***时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰***无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰***和双丙烯酰***通常含有一些金属离子,在丙烯酰***(MB-1Mallinckrodt),搅拌过夜,然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间,丙烯酰***和双丙烯酰***会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸,因此大于1年的溶液应该被丢弃。
%丙烯酰***(用于DNA测序,1L)
【配制方法】把380g丙烯酰***(DNA测序级)和20g N,N'-亚甲双丙烯酰***溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰***溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足
至终体积为1L。置棕色瓶中保存于室温。
【注意】见上述配制30%丙烯酰***的说明,40%丙烯酰***溶液用于DNA序列测定。
(ATP)溶液(1ml)
【配制方法】 ATP, ,用蒸馏水稀释1ml
【注意】分装成小份保存于-70℃
(1L)
【配制方法】把770g乙酸铵溶解于800ml蒸馏水中,加水稀释至1L后过滤除菌。在4°C储存。
【注意】乙酸铵是热不稳定的。不要高压灭菌。
%过硫酸铵溶液(10ml)
【配制方法】把1g过硫酸铵溶于8ml蒸馏水中,用蒸馏水补足体积至10ml。该溶液可在4℃保存数周。
CaCl2溶液(200ml)
【配制方法】称取54g CaCl2·6H2O并溶解在170ml蒸馏水中,用蒸馏水补足体积至200 ml。,分装成10ml小份贮存于-20℃。
【用法】制备感受态细胞时,将等分试样解冻,用蒸馏水稀释至100ml。通过Nalgene过滤器()过滤除菌,并在使用前冷却至0℃。
CaCl2溶液(20ml)
【配制方法】 CaCl2·6H2O并溶于15ml蒸馏水中,用蒸馏水补足体积至20ml。,分装成1ml小份贮存于-20℃。
(dNTPs)溶液
【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右, (用pH试纸检测),把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释,在给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度。
碱基
波长
消光系数(ε)(M-1·cm-1)
A
259
×104
G
253
×104
C
271
×103
T
260
×103
计算