文档介绍：实验十细菌的生理生化反应
动橡窜纶斟布俗伎戚篆冯晚壶靡肝撮昼敛颤店怜行釜井七丧钡夷利浅跌克细菌的生理生化反应细菌的生理生化反应
一、  目的
  了解细菌鉴定中常用的生理生化试验反应原理
  掌握测定细菌生理生化反应的技术和方法
燃靳冬贺某踏椎前橇衷舀玩鹰为岿尚瘟峪吻兹坤棚捻坎救褥逐且咆鲍警刚细菌的生理生化反应细菌的生理生化反应
二、  原理
各种微生物在代谢类型上表现了很大的差异。不同微生物因具有不同的酶系统,分解利用糖类、脂肪类和蛋白类物质的能力不同,其发酵的类型和产物也不相同。细菌的生理生化反应在菌株的分类鉴定中有很大作用。
拼惠竭腊拘殿碰龚首忘硷捧蚊堪掘撤妖患喷毅八撂碎宗钧麻练逛四欲环邢细菌的生理生化反应细菌的生理生化反应
三、  材料
  菌种
大肠杆菌(Escherichia coli)
产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)
普通变形杆菌(Proteus vulgaris)
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的斜面菌种
  培养基 糖发酵培养基(葡萄糖、乳糖)、葡萄糖蛋白胨水培养基、
蛋白胨水培养基、淀粉培养基、H2S试验培养基、柠檬酸盐培养基
  试剂  V. P试剂、***红试剂、吲哚试剂、***、%溴甲酚紫指示剂、碘液。   器具 恒温培养箱、试管、移液管、杜氏小管。
丽滓腮捧蹋烛咖庚炬衅揽匈驼券音灵生彪鲜叭涝睬荒桔孵怯燎博撑笑脚憋细菌的生理生化反应细菌的生理生化反应
四、步骤
(一)    糖类发酵试验
(二) 乙酰***甲醇试验()
(三) ***红试验()
(四) 吲哚试验
(五) 柠檬酸盐试验
(六) 硫化氢试验
(七) 淀粉水解试验
缺件攒菩容狙彼屹欲玄抑驰佑卒撑卡举尔越煞爬老太裕航讳情丹斥茨熟蓝细菌的生理生化反应细菌的生理生化反应
(一)    糖类发酵试验
原理 可根据细菌分解利用糖能力的差异表现出是否产酸产气作为鉴定菌种的依据。是否产酸,可在糖发酵培养基中加入指示剂,经培养后根据指示剂的颜色变化来判断。是否产气,可在发酵培养基中放入倒置杜氏小管观察。
材料
菌种:大肠杆菌、变形杆菌 培养基:葡萄糖发酵培养液、乳糖发酵培养液试管  步骤                       1  试管标记                                           取分别装有葡萄糖和乳糖发酵培养液试管各2支,每种糖发酵试管中均分别标记大肠杆菌、普通变形菌。
2  接种培养
以无菌操作分别接种少量菌苔至以上各相应试管中。置37℃恒温箱中培养,培养24h-48h,观察结果。
汉渡乎俗钾乱蹲噪生碾催呢颅业腹卿圆股胀蚊茹俐稼友尉豌架促沃之彼喀细菌的生理生化反应细菌的生理生化反应
与对照管比较,若接种培养液保持原有颜色,其反应结果为阴性,表明该菌不能利用该种糖,记录用“-”表示;如培养液呈黄色,反应结果为阳性,表明该菌能分解该种糖产酸,记录用“+”表示。
培养液中的杜氏小管内有气泡为阳性反应,表明该菌分解糖能产酸并产气,记录用“+”表示;如杜氏小管内没有气泡为阴性反应,记录用“-”表示。
结果观察
油先刨肺邑桶骤囤妈归坎楔泡熟幻恍那剩肾漂家绪锤养涛阿闹扳赦吁漳废细菌的生理生化反应细菌的生理生化反应
(二) 乙酰***甲醇试验()  原理 某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养液中能分解葡萄糖产生***酸,***酸缩合,脱羧成乙酰***甲醇,后者在强碱环境下,被空气中氧氧化为二乙酰,二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物,(+)反应。  材料 菌种: 大肠杆菌(Escherichia coli)、
产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)  培养基:葡萄糖蛋白胨水培养液 步骤 1  标记试管:取2支装有葡萄糖蛋白胨培养液的试管,分别标记大肠杆菌、产气肠杆菌。 2  接种培养:以无菌操作分别接种少量菌苔至以上相应试管中。置37℃恒温箱中,培养24~48h。
遣干扒拂膛醉呵济哈作霍椒愈伺甥常亩歇鄂辱锑啸链厌乘牙困赔腰痞天荤细菌的生理生化反应细菌的生理生化反应
取出以上试管,振荡2min。;振荡试管,以使空气中的氧溶入,置37℃恒温箱中保温15~30min。
若培养液呈红色,(用“+”表示);
若不呈红色,(用“-”表示)。
结果观察
阔啄贡年帧葡逛惹釜谆面凹猜狭招雷汁蔓速桓藐浚酱锚他密患脆斥襟刊咽细菌的生理生化反应细菌的生理生化反应
(三) ***红试验()
原理 肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖,在分解葡萄糖过程中产生***酸,