文档介绍：FNCPJZCY0045 茶硒的测定荧光比色法
F_NCP_JZ_CY_0045
茶—硒测定—比色法
1 范围
本方法适用于茶叶中硒的测定。
本方法的最低检出浓度为 mg/kg。
2 原理
在弱酸性条件下,亚硒酸与 2,3-二氨基萘作用,生成具有强荧光的 4,5-苯并苤硒脑络合
物,用环已烷萃取后,测其荧光强度并定量。
3 试剂
所用试剂应为分析纯以上,水为去离子水(电阻率在 8×105Ω以上)。
硫酸:优级纯。
混合酸:硝酸-硫酸-高氯酸(14+2+2)。
乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)溶液:(1+999)。
盐酸羟胺溶液:(1+9)
氨水(1+1)。
盐酸溶液(1+1)。
盐酸溶液()。
环己烷:经测定无荧光杂质,有必要时重蒸馏后使用。
甲酚红指示液:称取 甲酚红,加 1 滴氢氧化钠(1+1)和 10mL 水溶解,并稀释至
50mL。
2,3-二氨基萘(DNA)溶液:在暗室中配制。称取 ,加 盐酸溶液 100mL,
振摇使其溶解。将溶液转入 250mL 分液漏斗中,加 20mL 环已烷,剧烈振摇 5min,静置分层
后,弃取环已烷相。再加入 20mL 环已烷,重复萃取三次,收集水相于 100mL 棕色容量瓶,
用水定容并覆盖一层环已烷,储存于冰箱中,每次临用前再用 20mL 环已烷萃取一次。
硒标准溶液:准确称取 硒(纯度≥%)。加 5mL 硝酸,温热使其溶解;加水
稀释到 100mL。此溶液每毫升相当于 100μg 硒。
硒标准工作液:吸取 硒标准溶液置于 100mL 容量瓶,以 盐酸溶液稀释
至刻度,混匀,依次稀释到每毫升相当于 硒。
4 仪器设备
荧光分光光度计。
凯氏烧瓶:250mL。
分液漏斗:125mL,250mL。
电热恒温水浴锅。
控温电炉。
具塞三角烧瓶:100mL。
具塞刻度试管:5mL。
5 样品测定
样品前处理
称取 样品置于 250mL 凯氏烧瓶中,用少量水润湿样品,加入 18mL 混合酸,在控
温电炉上加热消化。应逐渐升高温度,消化至冒高氯酸白烟,保持 1min,此时溶液呈无色或
浅黄色,即为消化终点(在消化过程中如出现炭化现象,需重新取样消化)。取下冷却,加
20mL 水,继续加热至冒高氯酸白烟;取下稍冷,加 10mL 水,待冷却到室温,用 20mL~30mL
水将样液转入 100mL 具塞三角烧瓶中,加 EDTA-2Na 溶液 2mL。
按样品操作步骤,同时做试剂空白及相应含量的硒标准。
4,5-苯并苤硒脑络合物的形成
在上述消化液中加入2滴甲酚红指示剂,以氨水溶液(1+1)和盐酸溶液(1+1)调节至溶
液呈微橙红色。然后,加盐酸羟胺溶液(1+9