1 / 8
文档名称:

生物化学实验报告.doc

格式:doc   大小:96KB   页数:8页
下载后只包含 1 个 DOC 格式的文档,没有任何的图纸或源代码,查看文件列表

如果您已付费下载过本站文档,您可以点这里二次下载

分享

预览

生物化学实验报告.doc

上传人:小枷 2018/12/1 文件大小:96 KB

下载得到文件列表

生物化学实验报告.doc

相关文档

文档介绍

文档介绍:2012年生物化学实验B
实验报告
姓名: XXXX
学号: XXXXXX
实验时间: 2012年11月17日
实验分组: 第7组
组内成员: XXXXXXXXXXX
XXXXXXXXXXX
任课教师: XXXX
摘要
本实验通过从小牛肠中通过刮去,离心,析出等方式提取小牛肠碱性磷酸酶,再通过SDS-聚丙烯凝胶电泳测定蛋白质相对分子量,利用考马斯亮蓝法测定蛋白质含量及测定酶的活性。
实验部分

:
(1)正丁醇、丙酮。
(2)1 mol/L 醋酸,1 mol/L NaOH,硫酸铵。
(3)平衡缓冲液: mol/L Tris-HCl,pH 。
(4)底物缓冲液:1 mol/L 二乙醇胺-盐酸缓冲液。
(5)酶的底物溶液:用底物缓冲液配制15×10-3 mol/L 对硝基苯磷酸二钠溶液。
(6)30% 丙烯酰胺置棕色瓶。
(7)分离胶缓冲液: mol/L Tris-HCl缓冲液,pH ,已加入10% SDS。
(8)浓缩胶缓冲液: mol/L Tris-HCl缓冲液,pH ,已加入10% SDS。
(9)10% 过硫酸铵。
(10)TEMED(四甲基乙二胺)。
(11)上样缓冲液:称100 mg SDS、2 mg溴酚蓝、2 g甘油, mL巯基乙醇、2 mL pH Tris-HCl,加超纯水定容至10 mL。
(12)染色液:% 考马斯亮蓝R250,40%甲醇和10%冰醋酸的染色液500 mL,过滤后备用。
(13)脱色液:500 mL 10%甲醇和10%冰醋酸的脱色液1000 mL。
(14)电泳缓冲液。

匀浆机、eppebdorf5型冷冻离心机、GSY—2型恒温水浴、UV762型紫外可见分光光度计。离心管,剪刀,载玻片,不锈钢盘,搪瓷盘,滤布,漏斗,分液漏斗,量筒,烧杯,移液抢,比色皿,DYY—11型电泳仪,24D型电泳槽,制胶板,揺床,移液枪。
小牛肠碱性磷酸酶提取方法
1)取新鲜小牛肠,用剪刀剖开,用载玻片刮取小肠内粘膜,放到盘子一角。
2)将小肠粘膜液集中倒入匀浆机中,加冰冷蒸馏水,高速匀浆,重复多次。
3)缓慢加入冰冷正丁醇高速匀浆重复多次。在4℃,10000 rpm条件下离心。
4)用滤布过滤去除杂质,倒入分液漏斗中,静止分层,取下层水相,。4℃,10000 rpm,离心。
5)得到上清后放入离心管中,,称取硫酸铵加到离心管中溶解;再加冰冷丙酮,混匀,4℃静置30 min以上。4℃,10000 rpm,离心。
6)上清液中加入冰冷丙酮,4℃放置30 min以上。4℃,10000 rpm,离心。
7)取沉淀溶于平衡缓冲液至全部溶解至冰箱保存待用。
8)底物处理:底物37℃水浴5 min。
小牛肠碱性磷酸酶酶活检测方法
1)将酶稀释10倍。
2)紫外分光光度计检测条件为405 nm波长,测定时间60 s,取值2 s,-。3)取2个2 mL比色皿,加入上述(2)加热的底物缓冲液,校对归零。
4)将稀释10倍的酶液加到其中1个比色皿中(仪器外侧),用

最近更新

东亚和西北太平洋区域大气纬向动量局地平衡诊.. 2页

不定形耐火材料的低粉尘化技术 2页

2025年幼儿园教师考核工作报告范文 16页

三点法误差分离技术中的概念问题 2页

2025年幼儿园师德师风总结13篇 45页

七九式带式舟桥铁马SC2030舟车通过技术鉴定 2页

2025年幼儿园小班户外活动策划方案通用 21页

机场包清工装修合同草案3篇 52页

服装行业居间合同模板3篇 53页

时尚买手店设计服务协议3篇 51页

旅游景区房产居间合同模板3篇 48页

五年级语文上册期末考试卷【及参考答案】 8页

准确把握中国共产党历史主动精神的深刻内涵pp.. 18页

医疗培训工作计划与医疗安全工作计划汇编 3页

区水利局河道清障工作通知与区水务局防汛工作.. 5页

小乌鸦爱妈妈 13页

区卫生局2018年上半年工作总结以及下半年工作.. 27页

北师大版2019年一年级数学【下册】开学检测试.. 5页

加强争资金争项目指导意见与加强价格监管行为.. 11页

2024年《国有企业管理人员处分条例》测试题【.. 15页

浙教版小学四年级2022-2023学年劳动与技术教学.. 37页

2025年玉米烘干厂可行性报告模板 31页

驻村干部年度组织生活会个人对照检查材料 5页

医学伦理知情同意书 3页

刑事诉讼中的司法正义 5页

视网膜动脉阻塞 19页

道藏紫微斗数简体文字录入版(第一卷) 59页

(完整版)没头脑和不高兴拼音版 16页

分布式光伏并网中电能质量的监测及改善研究 3页