细胞生物学实验.ppt

文档介绍：细胞生物学实验
吕梁高等专科学校生命科学系
生物实验教学中心

实验一细胞凝集反应
一、实验目的:
1. 学****制备土豆凝集素
2. 掌握细胞凝集反应的实验方法及细胞凝聚的原理。
3. 观察凝集的现象
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二、实验原理
①细胞质膜外表面的一层黏性多糖物质构成的细胞全委会被在细胞间的联系和识别、细胞的生长分化、免疫反应及肿瘤发生等过程中发挥着重要作用。 ②动物细胞表面的糖蛋白、糖脂中的糖链伸向膜表面,它们是细胞识别、细胞免疫及细胞接触抑制现象的必要组分。
③凝集素是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一性结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果。 ④凝集素与糖分子结合有一定的专一性和结合价,并与细胞膜上受体的分布有关。
三、实验仪器
显微镜、粗天平、载玻片、滴管、离心管、离心机等.
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土豆块茎
四、实验材料
鸡血
细胞
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五、实验内容与实施过程
(50分钟):
用天平称取去皮的土豆块茎2g+10mlPBS缓冲液,浸泡2h→粗提液中含有可溶性土豆凝集素。
(35分钟):
%柠檬酸钠1ml抽取鸡静脉血液2ml,用生理盐水洗5次,每次2000r/min,离心5min,最后按压积红细胞体积用生理盐水配成2%红细胞液。
实验内容与实施过程
(50分钟):用滴管吸取土豆凝集素和2%红细胞液各一滴,置载玻片上,充分混匀,静置20min后于低倍显微镜下观察血
球凝集现象。
本实验过程很简单,只需要将植物凝集素与红细胞混合后用低倍显微镜观察现象即可。具体如下:
实验组
凝集素1滴
红细胞悬液1滴
对照组
PBS液1滴
红细胞悬液1滴
实验内容与实施过程
4、实验小结(15分钟):总结实验过程中学生的操作是否规范;实验是否成功,如果不成功,问题出在哪里;哪些实验作得比较好。提醒预****下节课实验内容,提问。共150分钟。
实验作业
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