文档介绍:一、白细胞计数
(一)白细胞生理:(复****自学)
要求:分化阶段、外周血白细胞与骨髓的关系、各种白细胞的功能。
(二)概念及原理:
WBC(white blood cell count):指测定每升外周血(循环池)中各种白细胞的总数。
将全血用稀乙酸溶液稀释一定倍数,使红细胞破坏后保留白细胞,充入计数池内,在显微镜(LPF)下计数一定范围内的白细胞数,并换算成每升血液中白细胞的总数。
(三)测定方法及评价:
:
:国家临床实验标准委员会(mittee for Clinical Laboratory  )
显微镜计数法
原理: 用稀乙酸将血液稀释并破坏红细胞,混匀后, 滴入计数盘中,在显微镜下计数一定范围内的白细胞数,经换算求得每升血液中白细胞总数。
器材和试剂
白细胞稀释液:冰乙酸
10g/L亚甲蓝数滴
蒸馏水加至100ml
器材同红细胞计数。
操作
a.
b. 用微量吸管吸取20ul末梢血。
c. 擦去微量吸管外余血,将其插入稀释液底部,轻轻
将血放出,并吸取上清液洗涤微量吸管3次(注意每次不
能冲浑稀释液),混匀。
d. 用微量吸管或玻璃棒取混匀的细胞悬液1滴,充入
计数池与盖片的缝隙中,静置2-3min,使白细胞下沉。
e. 低倍镜计数四角4个大方格内白细胞总数。
计算
X/4×10 ×20 ×106/L=白细胞/L
式中:在法定计量单位制中用△. △△×109/L表示
X:为4个大方格内白细胞总数。
÷4:为每大方格()内白细胞平均数。
×10:,换算成1ul。
×20:血液的稀释倍数。
×106:将ul换算成L
正常参考值
***: (4-10)×109/L
新生儿: (15-20)×109/L
6月-2岁:(11-12)×109/L
6. 注意事项
⊙采血时不能挤压过度,因此针刺深度必须适当。
⊙在大方格内压线细胞应按计数原则计数。
⊙稀释液要过滤,小试管、计数板须清洁,以免
杂质、微粒等被误认为细胞。
⊙充池前的摇匀要注意,气泡不能太多。
⊙加盖玻片方式:“推式”,不要“盖式”。
考核评价
a. 常规考核标准(RCS)
RCS= ×100%
评价: 白细胞≤ 4×109/L者, RCS<30%
白细胞在(-)×109/L者 RCS<20%
白细胞≥15 ×109/L者 RCS<15%
超过上述标准者为不合格
四大格所见白细胞最大值—最小值
四大格所见白细胞数平均值
b、计数误差:技术误差与固有误差
c、有核红细胞的影响:
校正后白细胞数/L=X×100/(100+Y)
如:某患者白细胞计数为20×109 /L,血片分类计数200个白细胞时,见到有核红细胞50个,问该患者白细胞校正后数应为多少?
d、经验控制: