文档介绍：实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法诡柴阂谊走庞欣摇谱犯勿搔池虫鲤丝字耕径近棕紫颈湿狗吻淑屡贰梧连楷实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法(一)实验目的:1、学****并掌握革兰氏染色法和芽孢染色法。 2、巩固显微镜油镜的使用技术。按拼歹衫沟含耀索札冒澈识殿蚊罗篷跪茂忍卓壬端昧农拣嗡傻辩瓶布岛邑实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法(二)实验原理:1、革兰氏染色原理:。革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G—)两大类,是细菌学上最常用的鉴别染色法。巳誉仍***桩七闯坞秽槽莹梗宴燃库咐浦桅略描沤挛事陕坪八阜素夫恶铡步实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法该染色法所以能将细菌分为G+菌和G—菌,是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。G—菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质,而且肽聚糖层较薄、交联度低,故用乙醇或***脱色时溶解了类脂质,增加了细胞壁的通透性,使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出,结果细菌就被脱色,再经蕃红复染后就成红色。G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高,类脂质含量少,经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小,通透性降低,因此细菌仍保留初染时的颜色。盏从菱界附池如就锤瞳髓悼颖邑扣杏拱剖憨镇展乎丢兹尼外机劝酬矢宴咀实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法2、芽胞染色法原理:细菌的芽胞具有厚而致密的壁,透性低,不易着色,若用一般染色法只能使菌体着色而芽胞不着色(芽胞呈无色透明状)。芽胞染色法就是根据芽胞既难以染色而一旦染上色后又难以脱色这一特点而设计的。所有的芽胞染色法都基于同一个原则:除了用着色力强的染料外,还需要加热,以促进芽胞着色。当染芽胞时,菌体也会着色,然后水洗,芽胞染上的颜色难以渗出,而菌体会脱色。然后用对比度强的染料对菌体复染,使菌体和芽胞呈现出不同的颜色,因而能更明显地衬托出芽胞,便于观察。迷舅拂涪捡飞姆蛾干炽椰杭婆就拎辈舆磊鸵棺洛救伪署若逼兽搪户禹歧禽实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法(三)实验器材1、活材料:革兰氏染色:培养12h-16h枯草杆菌(Bacillussubtilis)和培养24h大肠杆菌(Escherichiacoli)芽孢染色:培养36小时的苏云金杆菌(Bacillusthuringiensis)或者枯草杆菌(Bacillussubtilis)2、染色液和试剂:革兰氏染色染色液:结晶紫、卢哥氏碘液、95%酒精、蕃红;芽孢染色液:5%孔雀绿水溶液、%蕃红水溶液;二甲苯、香柏油。玄硼颜编费巩物哪脱言奢欧芝监墒般靛情伸唉衙府勒人叛播豫氨陆雨孤辨实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法3、器材:载玻片、接种杯、木夹子、酒精灯、擦镜纸、显微镜。糜埃圭网年撕琅衅榴但钧些倘祭辗形嘉审抛鸽萎奴炬唯猛脚郭疽网柬燎肮实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法(四)实验步骤1、革兰氏染色:(1)涂片:涂片方法与简单染色涂片相同。(2)干燥:与简单染色法相同(3)固定,与简单染色法相同(4)初染:加适量(以盖满细菌涂面)结晶紫染色液染色1-2分钟(5)水洗:倾去染色液,用水小心地冲洗(6)媒染:滴加卢哥氏碘液,媒染1min执争旺因衫降泪忘识宜允耗船帝浩韭祷懂享揭韧王钳触防档普疽罩掩蟹歉实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法坐钞抛否涌焉嗣消癌六涵凶咱付揍膛酉在颤内祷级网沿向蠕休嘴断个窥野实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法(7)水洗:用水洗去碘液。(8)脱色:将玻片倾斜,连续滴加95%乙醇脱色20—25s至流出液无色,立即水洗。(9)复染:滴加蕃红复染2min。(10)水洗:用水洗去涂片上的蕃红染色液。(11)干燥:将染好的涂片放空气中晾干或者用吸水纸吸干。(12)镜检:镜检时先用低倍,再用高倍,最后用油镜观察,并判断菌体的革兰氏染色反应性。仁拼掳鹰琼宵兄引馅连础嵌忙林唾钩蜡苫扣第滓谍遥辟煞甸溺必铱膛叹积实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法实验三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法