文档介绍：液相色谱基础知识
2017年04月11日
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一、什么是色谱
色谱是一种分离工具,而不是传统意义上的分析仪器。
色谱法也叫层析法,它是一种高效能的物理分离技术,将它用于分析化学并配合适当的检测手段,就成为色谱分析法。
常见的分离方法:
蒸馏、离心、电泳、过滤、超滤、等等。
色谱法的发明人:
俄国科学家:
M. S. Tswett
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二、什么是液相色谱呢
液相色谱:流动相是液相
液相色谱
柱色谱
纸色谱
HPLC
薄层色谱
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三、什么是高效液相色谱
High Performance Liquid Chromatography高效液相色谱法,简称:HPLC
是一种区别于经典液相色谱;基于仪器方法的高效能分离手段。
具有高性能的色谱柱,高精度、耐高压的输液泵以及高灵敏度的检测器。
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HPLC的分离原理、仪器配制和工作流程
分离原理
动画演示
溶剂
色谱泵
进样器
HPLC色谱柱
检测器
废液
数据处理系统
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四、高效液相色谱法的特点
“三高一广一快”:
①高压:对载液加高,流动相能迅速通过色谱柱压.
②高效:分离效能高。
③高灵敏度:,进样量在uL数量级。
④应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析。
⑤分析速度快:较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15—30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。
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五、高效液相色谱法的主要类型及原理
1、液-液分配色谱
2、液-固吸附色谱
3、离子交换色谱
4、离子对色谱
5、离子色谱
6、排阻色谱
7、亲和色谱(AC)
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1、液-液分配色谱
固定相与流动相均为液体(互不相溶);
基本原理:组分在固定相和流动相上的分配;
流动相:对于亲水性固定液,采用疏水性流动相,即流动相的极性小于固定液的极性(正相 normal phase),反之,流动相的极性大于固定液的极性(反相 reverse phase)。正相与反相的出峰顺序相反;
固定相:早期涂渍固定液,固定液流失,较少采用;
化学键合固定相:将各种不同基团通过化学反应键合到硅胶(担体)表面的游离羟基上。C18柱(反相柱)以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。
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反相高效液相色谱法
即指流动相的极性大于固定相极性的色谱方法。
在本法中常采用化学键合相作为固定相,流动相采用水—甲醇或水—乙***系统,在反相色谱中,极性强的组分在分离时先流出柱子,极性弱的组分后流出。因此适合于共存组分极性差异较大的样品分析。
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乙***(jīng)
乙***又名******,,无色透明液体,密度小于水,,能与水和乙醇等有机溶剂以任意比混溶,易燃,有毒性。
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