文档介绍：土壤酶活性的测定方法
周礼恺张志明
中国科学院林业土城研究所
近来对土壤酶的研究, 在我国引起了广泛的注与土壤腐殖物质的腐殖化程度是呈负相关。因此, 河
意。本文结合作者近年来的工作, 就儿种主要土壤酶定土壤多酚氧化酶的活性, 能在一定程度上了解土壤
活性的测定方法, 介绍如下的腐殖化进程。
洲定方法取克过毫米筛的风千土样置于带
、
一过氧化氢,
酶磨口瓶塞的毫升容量瓶中注入毫升连苯三
过氧化氢酶几乎存在在所有的生物体里, 在某些酚溶液为基质。摇荡瓶中内容物, 并将瓶置于“恒
细菌里, 其数量约为细胞千重的。它能促进过氧温箱中培养小时。培养结束后, 往瓶中加入毫升
化氢对各种化合物的氧化。土壤的过氧化氢酶活性, 柠檬酸一磷酸缓冲液, 并加***至刻度。用力
与土壤呼吸强度和土壤微生物活动相关, 在一定程度摇荡数次, 使连***溶液经酶促作用所生成的红紫
上反映了土壤微生物学过程的强度。根际土壤的过氧梧精从培养液的水相被萃到***相中, 用分液漏斗分
化氢酶活性, 远较根际外土壤的为高。有机质含量高开, 取含溶解红紫梧精的着色***进行紫外光谱比色
。
的土壤, 过氧化氢酶的活性较强。因此, 土壤过氧化用厘米石英液槽和波长为产的滤光片另
。
氢酶的活性可以表征土壤总的生物学活性和肥力状设无连苯三酶溶液的土壤和连***溶液做对照红
。
况。紫格精的量, 根据用***钾得出的标准曲线查知
测定土壤的过氧化氢酶活性, 多采用测压法和滴土壤的多酚氧化酶活性, 以每百克土的红紫梧精的毫
。
定法。前者是测定过氧化氢分解时析出的氧量方法克数表示
、、,
简单, 但准确性较差。后者是定量滴定酶促反应后剩试剂一连***柠檬酸一
余的过氧化氢量, 此法测定结果较好。方法如下。磷酸缓冲液***重
侧定方法取克过毫米筛的风干土样、置于铭酸钾标准液取克***钾溶于升
。
毫升锥形瓶中, 注入毫升蒸馏水和毫升过氧相当于—毫升***中含毫克红紫格精
化氢。另设对照往瓶中注入毫升蒸馏水和毫升
、
, 。, 三化
。过氧化氢而不加土样将瓶塞紧置于转酶
次分钟往返式摇床上, 振荡分钟。随后, 注入毫转化酶蔗糖酶, 正确的用语是月一吠喃果糖甘
升硫酸以终止反应, 将瓶中内容物用致密滤纸过酶是研究的最多的一种土壤酶。转化酶存在在所有
。
滤取毫升滤液用高锰酸钾溶液滴定至微的土壤里它能酶促蔗糖分子中果糖残基内的月一葡糖
红色。土壤的过氧化氢酶活性, 以单位土重的普碳原子处的键裂解使蔗糖水解成葡萄糖和果糖。土
高锰酸钾毫升数对照与试验测定的差表示。壤的转化酶活性, 与土壤中的腐殖质, 水溶性有机质
试荆。。。和粘粒的含量以及微生物的数量及其活动呈正相关。
。。随着土壤熟化程度的提高, 转化酶的活性亦增强。一
般说, 在中性钙质土里, 转化酶的活性最高其次为
、
二多酚氧化酶。
中性耕作土砂质土和酸性土较低人们常用土壤的
多酚氧化酶能酶促一、二及三元酚的氧化。氧化转化酶活性来表征土壤的熟化程度和肥力水平。
的最终产物是醒, 如邻苯二酚在多酚氧化酶作用下可土壤转化酶活性的测定方法, 有化学法和物理
氧化成相应的醒。法。化学法是测定蔗糖水解时生成的还原己搪的量