文档介绍：安徽大学
硕士学位论文
发根农杆菌诱导甘薯发根及其应用研究
姓名:吴飞
申请学位级别:硕士
专业:细胞生物学
指导教师:王钰
20070501
中文摘要甘薯����.�����.,￡��侵匾5牧甘场⑺橇虾凸ひ翟�献魑铮���人体的防癌、抗癌等保健作用,早被国内外研究证实,被认为是�世纪人类最理想的食物。甘薯茎线虫病已成为制约我国甘薯生产的三大严重病害之一,由马铃�������穑��昀匆狄焉仙�1狈绞砬�钛现�的病害。为了很好地控制线虫病的发生和危害,必须了解植物寄生线虫的生活习性、生理生化特性、遗传特性和防治机理。因而建立一个适合线虫的培养体系,培养得到大量的一致的线虫群体作为研究对象就显得十分重要。本文围绕发根农杆菌发根培养无菌植物线虫体系的建立,研究线虫与寄主之间的抗感关系,旨在建立一种从细胞水平上研究植物和线虫关系的新的技术途径。其主要结果如下:��杂盏几适硇焓��⒏�奶跫��杏呕��匝榘碽��正交设计。通过��觳庑焓��推浞⒏�械膔�基因。得到最佳诱导条件:用发根农杆菌�经���侵染,通过��罨�男焓��木デ卸紊�煞⒏�姆⒏�盏悸首�高,最佳的除菌羧苄青霉素浓度为�甇�/���检测证明缛到的发根是发根农杆菌诱导产生的。在此优化条件下诱导的发根诱导率高,得到发根的可靠性强,且生成的发根粗壮、生长迅速、分支众多。���梅⒏�└司鶤�;�适砥分中焓��秃�懿菲分痔旌�号的发根,建立甘薯茎线虫病病原线虫的单寄主培养体系。通过该体系对马铃薯腐烂线虫的行为进行观察以及繁殖情况进行调查。结果表明:马铃薯腐烂线虫在甘薯和胡萝�⒏�隙寄苷�7⒂�头敝常�瓿善渖�钪芷冢号嘌�周和�芎螅�诟适矸⒏�上线虫繁殖倍数分别为��和�.�叮涸诤�懿贩⒏�舷叱娣敝潮妒�直鹞�.�和��倍:相同培养时间内,线虫在甘薯发根上的繁殖数极显著高于在胡萝卜发根上的繁殖数:利用发根系统繁殖马铃薯腐烂线虫,便于研究其行为,在显微镜下可以直接观察到线虫在发根上活动情况,这对研究发根和线虫相互关系十分有利。初步证实构建甘薯发根单寄主培养体系繁殖马铃薯腐烂线虫是可行的,且优��臼笛樗�褂玫姆⒏���个月以上的连续培养,生长迅速,发根易于继代培养,未出现退化。利用该体系鉴定甘薯品种抗线虫特性表明:在甘薯品种徐薯�、栗子香和鲁���盏嫉姆⒏�逑瞪希�又致砹迨砀�孟叱妫�薯腐烂线虫������于胡萝�⒏�敝陈砹迨砀�孟叱嫣逑怠��芎�
调查发根繁殖线虫情况及线虫侵染发根情况,然后评价它们的抗线虫特性。结果表明:培养�芎螅�叱嬖谛焓��⒗踝酉愫吐���发根上繁殖倍数分别为����.�和���辉谛焓��⒏�瞎鄄斓蕉啻ο叱媲秩胛坏悖�诶踝酉愫吐����⒏�现还鄄斓揭淮ο叱媲秩胛坏悖换�谝陨辖峁���ㄐ焓��R赘�线虫病品种,粟子香和鲁���?瓜叱娌∑分帧<�ń峁�砻饔貌煌�分值母�薯发根作鉴定其抗线虫特性具有体系简单、直观方便、重复性好以及不受自然环境影响等优点,进一步完善可以作为植物对线虫病抗性鉴定新的体系。关键词:发根农杆菌,甘薯发根,马铃薯腐烂线虫,单寄主培养,抗性鉴定发根农杆菌诱导甘薯发根及其应用研究�
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