文档介绍：HIV实验室诊断人类免疫缺陷病毒(humanimmunodeficiencyvirus,HIV)及其相关标志的检测是预防HIV感染和艾滋病临床治疗中重要的环节,在艾滋病的防治工作中具有重要作用,如艾滋病的诊断、HIV感染的诊断、血源及器官供体的筛选、流行病学调查、艾滋病病人及HIV感染者的病情动态观察、临床治疗疗效考核以及HIV疫苗的安全性和效果鉴定等。HIV感染标志分为病毒标志、免疫标志和相关标志三大类。病毒标志是指直接从HIV感染者体内分离出病毒或检出HIV组成成分(抗原或核酸)。免疫标志是指HIV感染所产生的HIV抗原、抗体等免疫物质。相关标志是指HIV感染后与艾滋病病情进展有密切关系的某些标志,如CD4细胞、CD8细胞,β2微球蛋白、有关细胞因子等。这些标志的测定可为HIV感染及临床疗效的考核提供极为重要的诊断、治疗和预后指征。目前HIV抗体的检测是艾滋病实验室检测中最常用的方法,因为HIV抗体是患者感染HIV后最容易检出并且持续时间最长的免疫学标志,而且抗体的检测方法大多简便、经济,易于推广应用。在介绍各种HIV实验室诊断方法之前,为了使实验室工作人员能够有效地确保结果准确、可靠、优质,我们必须对作为一种感染因子的HIV以及由它所导致的致命性危害有基本的认识。实验室工作人员应特别注意病毒的结构、抗原组成,人体的免疫反应,诊断试验的基本原理、试验结果的解释,以及为了准确而有效地提供实验诊断所必需的质量保证措施。如果由于缺乏技术专长或基本知识而造成不正确的试验结果是不可原谅的。现将有关内容扼要介绍如下:一、人类免疫缺陷病毒(HIV)概述艾滋病病原体的发现和命名年份事由命名1981美国首先在洛杉矶男性***中发现5例以往很罕见的卡氏肺囊虫肺炎和26例卡波济氏肉瘤患者,这些病人均表现有严重的免疫缺陷,但原因不明。1982年将这种新的疾病命名为“获得性免疫缺陷综合征”AcquiredImmunoDeficiencySyndrome,AIDS,即艾滋病1983从艾滋病流行学资料分析很可能是由病毒引起的。法国巴斯德研究所Montagnier等首先从多发性淋巴结病综合症病人分离到一种新的逆转录病毒淋巴结病相关病毒LymphadenopathyAssociatedVirus,LAV1984美国国立癌症研究所RobertGallo等报道从艾滋病病人活检组织分离到一种新的逆转录病毒与其以前发现的HTLV-1和HTLV-Ⅱ不同。人类嗜T淋巴细胞Ⅲ型病毒HumanT-cellLymphatropicVirustypeⅢ,HTLV-Ⅲ1984美国加州大学分离出艾滋病相关病毒AIDSRelatedVirus,ARV1986国际病毒分类委员会将上述病毒统一命名为人类免疫缺陷病毒HumanImmunodeficiencyVirus,HIV年份事由命名1986Montagnier等又从西非病人体内分离出一种具有相似生物学特性,而致病性、抗原性及分子生物学特征有明显差别的新病毒。新发现的病毒命名为HIV-2,原来发现且已广泛流行的HIV称HIV-1。(二)HIV病毒的形态结构、分类和分型HIV病毒是带有包膜的RNA逆转录病毒,在分类上属于逆转录病毒科中的慢病毒亚科。目前发现有HIV-1和HIV-2两型。现已将HIV-1分为M组,共10个亚型(A-J)和O组,HIV-2也至少有6个亚型(A-F)。在我国流行的是HIV-1,检测到的亚型有8种之多,其中B亚型几乎见于我国各个地区,而C亚型主要见于我国西南和西北地区,E亚型则多见于东南沿海和西南边境地区。HIV病毒呈球形或卵圆形颗粒,直径100-140mm,具有包膜。包膜是在病毒出芽释放过程中获得的。从脂质膜上延伸出来的刺和园头是糖蛋白(gp)。病毒颗粒内部为核心,具有蛋白质衣壳,里面有两个相同拷贝的核酸(RNA)和病毒的三种酶:逆转录酶(RT)、整合酶和蛋白酶。HIV基因组(RNA)含有9个基因,可分为结构基因和调节基因。结构基因包括gag、pol和env3个,皆为调节基因。(三)与诊断技术密切相关的HIV抗原由三个结构基因编码的HIV-1抗原如下:1、gag蛋白:位于病毒颗粒内核心部位,主要有分子量为55000道尔顿的蛋白质(P),称P55。P55抗原是前体蛋白,在感染过程的早期产生,尔后裂解成其他核蛋白,包括P24、P17和P15等。2、env(包膜)糖蛋白:包膜抗原皆为糖蛋白(gp),根据分子量分别称为gp160、gp120和gp41。gp160是前体蛋白,是在感染过程中产生的一种成份,随后裂解成gp120和gp41。gp120是外膜蛋白,组成外膜的72个刺突和园头。gp41为跨膜蛋白。二者共同参与病毒与突主细胞CD4分子的粘附。3、pol(聚合酶)蛋白质:包括P66(RT)、P51和P31(整合酶或核