液相色谱实用技术_色谱柱的使用及保养.ppt

文档介绍：液相色谱实用技术
色谱柱的使用及保养
良好的色谱实验****惯
拿到一根新色谱柱时,先测柱效
保留在新色谱柱上测得的色谱图,并记录条件
定期检测柱效
定期检测仪器的谱带展宽
色谱柱的使用及操作
流动相的转换
特别是GPC柱
流速(压力)的变化幅度
温度的变化幅度
专用色谱柱∶样品及溶剂的要求
色谱柱的保养(一)
样品方面
除去微粒及杂质
了解样品在流动相中的溶解度
如样品的溶剂不是流动相,一定要用流动相试溶解度,防止其在流动相中析出
了解样品与色谱柱的基质/填料是否相互作用
色谱柱的保养(二)
流动相方面
除去微粒
纯度的要求
超纯水,梯度实验时水中有机杂质含量要低
缓冲液的pH值,在填料的允许范围内
缓冲液(盐)的浓度
溶剂:色谱纯,并与填料相匹配
溶剂中的杂质含量
流动相对样品的溶解度
有机溶剂或水的比例
在线的保护装置
给色谱柱提供物理的保护
除去样品及流动相中的颗粒
给色谱柱提供化学的保护
防止分析柱被化学污染
装置
在线过滤器
自装填料保护柱
预装保护柱
在线过滤器
In-Line Filter,部件号 WAT084560
防止颗粒在色谱柱头累积
优点:基本不影响柱效
在需要高柱效的分析时中常用(如:氨基酸分析)
可更换的消耗品
更换滤芯,部件号 WAT005139 (5/pkgs)
更换垫圈,部件号 WAT084567 (10/pkgs)
保护柱
可避免化学污染。多数保护柱影响到整个色谱柱的柱效,特别是在用微柱时
保护柱的种类
普通自装填料的保护柱
Waters的部件号,WAT084550,用户自装填料
影响柱效同装填技术有关,柱效降低较大
Guard-Pak预装保护柱
Waters的部件号,WAT088141
有各种填料的预装柱供选择,使用方便。填料容积较小,也引起柱效降低
可换芯式保护柱
新型的保护柱— Sentry Guard
适应的用户类型
非常脏, 非常复杂的样品本底
生化样品, 溶液
环境样品
食品
不想作太多的固相萃取
不想降低柱效