文档介绍：遗传��
银杏叶绿体��的分离提纯
李冠一林栖凤黎荣松
(武汉大学)
叶绿体是植物进行光合作用的极为重要的��,��,��
细胞器。本世纪初,��等根据植物叶子��溶液��
的花斑现象具有母性遗传的特征,推测叶绿体��,��
中可能存在着某些特殊的遗传因子,但是在其电极缓冲液��
后的近半个世纪里,叶绿体基因存在与否始终��,��,��
未能得到肯定,直到六十年代初,随着核酸检测
技术和电镜技术的发展,叶绿体基因的存在才方法
最后得到证实。��年��,等用电镜观察到(一) 叶绿体的分离纯化
衣藻叶绿体中存在着纤维状��年�.蔗糖梯度离心法参考文献[��并略
��和石田政弘〔��应用超离心技术,从衣藻叶加改进。取新鲜银杏叶��克,去叶脉,洗净,
绿体中首次成功地分离提取了��。由于在剪碎。加入��冷的��溶液于组织
高等植物中叶绿体基因组比较简单,而且它的捣碎器中间歇捣碎,捣碎液经多层纱布过滤,滤
非孟德尔遗传方式对叶绿体基因组的结构及其液经��离心�分钟,除去细胞碎片及未破
遗传分析带来极大方便。此外叶绿体作为真核碎细胞等,将上层悬液于��离心��分
细胞的细胞器,其��及基因表达系统却又钟,收集沉淀并用��溶液洗涤��
与原核细胞的极为类似,因此叶绿体也是研究次,得粗制叶绿体沉淀。将此沉淀悬浮于��
真核基因和原核基因之间相互关系的好材料。��冷溶液,在蔗糖梯度上铺层、离心。梯度
叶绿休基因组的研究无论在理论上还是在实际溶液的制备方法是,在��的离心管中依次加
上均有着重要意义。人��外、��外、��多的蔗糖溶液��
我之居脚座矛材群,参考��和杉��,放置�小时后,在液面小心铺加粗制叶绿
浦昌弘〔��的方法,并加以改进,分离制得叶绿体体悬液��离心��分钟,收集
��· 简称��叶绿体区带,用适量��溶液洗涤�次,
��离心��分钟, 所得沉淀即为纯净叶
试剂
绿体,将其悬浮于��溶液中,低温保存
��溶液��蔗糖,��备用。以上操作均在�℃下进行。
��琉基乙醇,��多�.差速离心法参考文献【��进行。取
��(牛血清白蛋白),��新鲜银杏叶��克,去叶脉,洗净,剪碎。加人
�溶液��甘露醇, ��冷的�液,用组织捣碎器间歇捣碎,经多
��琉基乙醇, ��%
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�溶滴��廿露破_ ��本文于��,年�