文档介绍：葡萄糖分子中航油游离醛基,果糖分子中含有游离***基,乳糖和麦芽糖分子中含有游离的半缩醛羟基,因此它们具有还原性,是还原糖。其他非还原糖,如常见的蔗糖、糊精淀粉等,它们本身不具有还原性,但可以通过水解反应成具有还原性的单糖,再进行测定,然后换算成样品中的相应的糖类的含量。所以还原糖的测定为糖类的测定的基础。测豆浆中还原糖含量的两种方法有3,5-二硝基水杨酸法操作简便,快速,杂质干扰较少;费林试剂法操作复杂,易受人为、主观因素影响,可靠性差。故测定豆浆中还原糖应以水杨酸法较为适合。实验原理3,5-二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内,还原糖的量和反应液的颜色强度呈比例关系,利用比色法可测知样品的含糖量。试剂与仪器①3,5-二硝基水杨酸试剂(又称DNS试剂):甲液:%氢氧化钠中,并稀释至69mL,。乙液:称取255g酒石酸钠,加到300mL10%氢氧化钠中,再加入880mL1%3,5-二硝基水杨酸溶液。将甲液与乙液相混合即得黄色试剂,贮于棕色试剂瓶中。在室温下,放置7—10天以后使用。②葡萄糖标准液:准确称取干燥至恒重的分析纯葡萄糖100mg,加少量蒸馏水溶解后,。③乙酸锌溶液:,加3ml冰乙酸并稀释至1000ml。④106g/L亚铁***化钾溶液:***化钾,溶于水中,稀释至100ml。⑤过滤装置⑥电热恒温水浴⑦721分光光度计实验步骤葡萄糖标准曲线制作取葡萄糖标准溶液(1mg/ml)0-,均用蒸馏水稀释至1ml,加入1mlDNS试剂,在沸水浴中加热5min,取出以自来水冷却,再加入蒸馏水8mL混匀,在波长520nm下,以1cm比色杯测定各管光密度(空白管溶液调零),以葡萄糖含量(mg)为横坐标,相应各管光密度值为纵坐标绘制标准曲线。样品的预处理取豆浆30ml置于100ml容量瓶中,边摇边慢慢加入5ml乙酸锌和5ml亚铁***化钾溶液,加水至刻度,摇匀。静置30min。用滤纸过滤,收集滤液备用。注意:乙酸锌可去除蛋白质、鞣质、树脂等,使它们形成沉淀,经过滤除去。样品中还原糖含量的测定将豆浆过滤,取滤液1ml,加入1mlDNS试剂,在沸水浴中加热5min,取出以自来水冷却,再加入蒸馏水8ml混匀,在波长520nm下,测定样品吸光度。查标准曲线即可计算出还原糖的含量。④按下式计算出样品中还原糖的百分含量:式中:X—查标准曲线所得待测样品液中还原糖量(mg);V样—样品液体积(ml);V—稀释后的样品液总体积(ml)V1—待测样品液的体积(ml)参考文献[1]黄伟坤,食品分析与检验,轻工业出版社,1997[2],杨严俊译,食品分析(第二版),轻工业出版社,2002[3]周素珊、黄尔义、刘志杰,豆浆中还原糖成分的检测与分析,《福建农林》第3期