文档介绍：实验一从牛奶中提取酪蛋白一、。。二、实验原理牛乳中的主要蛋白质是酪蛋白,。酪蛋白是含磷蛋白质的混合物,-,不溶于水、醇、有机溶剂,,,酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物,除去脂质杂质后便可得到纯的酪蛋白。三、原料与器材鲜牛奶、恒温水浴锅、台式离心机、抽滤装置。四、%***-醋酸钠缓冲液A液(-醋酸钠溶液):,定容至2000ml。B液(-醋酸钠溶液):称取优级纯醋酸(%),定容至1000ml。-醋酸钠缓冲液3000ml。-***混合液乙醇:***=1:1(体积比)。五、,在水浴中加热至40℃,在搅拌下漫漫加入预热至40℃(应注意两种液体都应先预热至40℃再用),-醋酸钠缓冲液5ml,(用1%NaOH或10%醋酸溶液进行调整)。观察牛奶开始有絮状沉淀出现后,保温一定时间使沉淀完全。将上述悬浮液冷却至室温。离心分离8min(8000r/min)或15min(2000r/min),弃去上清液,得到酪蛋白粗制品。(洗涤时将沉淀颗粒用干净吸管吹开或用毛细管的封闭一端搅开,充分洗涤),离心5min(12000r/min)或10min(3000r/min),弃去上清液。%的乙醇,搅拌片刻,将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤。用乙醇-***混合液洗涤沉淀2次,最后用***洗涤沉淀2次,抽干。,风干,得酪蛋白精制品。(g)。六、计算含量和得率:酪蛋白含量(g/ml)=酪蛋白(g)/50ml×100%;得率=测得含量/理论含量×100%。七、实验注意事项:,否则对离心机损坏严重;,并擦干表面的水分和污物后方可放入离心机。,然后检查离心腔中有无水迹和污物,擦除干净后才能盖上盖子放好保存,以免生锈和损坏。八、思考题:?。实验二凯氏定氮法测定面粉中的粗蛋白质含量一、实验目的与要求:  。、蒸馏、吸收及滴定等基本操作技能与含氮量的计算。二、实验原理样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,其中C、H形成CO2、H2O逸出,而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵留在酸液中。然后将消化液碱化,蒸馏,使氨游离,用水蒸气蒸出,用硼酸吸收。。吸收氨后的硼酸再以标准盐酸溶液滴定所生成的硼酸铵,根据标准盐酸溶液消耗量可计算出总氮量,再折算为粗蛋白含量。2NH2-(CH2)2-COOH+13H2SO4=(NH4)2SO4+6CO2↑+12SO2↑+16H2O(NH4)2SO4+2NaOH=2NH3↑+Na2SO4+2H2O2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3三、样品:面粉四、仪器与试剂仪器:凯氏烧瓶、微量凯氏定氮装置、微量滴定管、加热套1000W试剂:所有试剂均用不含氮的蒸馏水配制。:浓H2SO4硫酸铜(固体)硫酸钾(固体)%硼酸(H3BO3)溶液:10g硼酸(化学纯)溶解于500m1热水中,摇匀备用。%:临用时,把溶解于95%%溴甲酚绿溶液10毫升和溶于95%%***红溶液2毫升混合而成(比例5:1).(公用)五、测定方法样品消化: (勿粘附在瓶壁上),、6gK2SO4及25mL浓硫酸,轻轻摇匀后,用消化炉以小火加热,待泡沫停止产生后,加大火力,至液体变蓝绿色透明后,再继续加热微沸30分钟。取50~60mL蒸馏水,徐徐加入烧瓶中,以释放潜热,待样品冷至室温,移入250mL的容量瓶中,用蒸馏水冲洗烧瓶数次,洗液并入容量瓶中,旋转混匀放冷,再用蒸馏水定容,备用。同时做一空白消化(空白消化只加试剂,不加样品)。蒸馏与吸收:加碱加酸(1)将所有的开关打开。从样品加入口加入5