文档介绍：�约&疟致死株单克隆抗原决定簇�����完全弗氏佐荆胎牛血清流式细胞术。黄嘌呤磷酸核糖辣根过氧化物酶磷酸盐缓冲液约氏疟非致死株�������������������’�������������猙������畒������������
导师签名.≯‘学位论文作者签名�礻�学位论文作者签名:亟艰独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。签字同期:�!�年����学位论文使用授权书声明本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。�C艿难�宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌���年����签字日期:��年��书�
。,据��钚鹿兰疲�全球仍有�%的人生活在疟疾流行区,每年死亡人数达三百万。随着疟原虫及其蚊媒的抗药性日益增强,迫切需要研制高效的疟疾疫苗。但由于疟原虫生活史复杂、抗原变异性大等原因,单价疫苗免疫效果并不理想。因此,研隶《复合多价疫苗成为预防疟疾的一条潜在的有效途径。而多价疫苗应包含疟原虫的多个能够发挥保护性体液免疫应答翻细胞免疫应答作用的抗原表位�细胞表位和�赴�砦�,以更有效地发挥免疫保护作用。但近年来所发现的针对红内期疟原虫感染的保护性抗原,绝大多数是针对保护性体液免疫的抗原。目前已鉴定了具有细胞��������青堰屎颂嫠岵咕群铣赏揪吨械囊恢置浮U庵置妇�有高度保守性,在哺乳动物及疟原虫体内均存在,可催化��姿岷颂墙沽�酸���与嘌呤反应生成嘌呤核营酸。本实验室已利用毕氏酵母系统表达并纯化了恶性疟���重组蛋自,本研究在此基础上,检测���重组蛋白对约氏疟易感小鼠���/�∈�的免疫原性;对不同约氏疟虫株�.������感染的免疫保护作用;建立针对���蛋自特异的�概�晶系,以确定其保护性细胞免疫的作用;从而为疟疾疫苗的研制提供基为研究���重组蛋白的免疫原性,我们将���重组蛋囱与完全弗氏佐剂�������孚��⒚庖逤��/��螅��以不完全弗氏佐剂��������孥��鞍准忧棵庖吡�次,设立小牛血清白蛋白������和��樽魑6哉�组,并在每次免疫的前一天尾静脉取血,用酶联免疫吸附试验����摹�定血清抗���重组蛋白抗体滴度;我们还将���重组蛋白与��巍纯并免疫��/��螅�枇��和��樽魑6哉兆椤<忧棵庖咭淮魏螅�无菌取小鼠脾脏、淋巴结,制备淋巴细胞悬液,通过��勘昙堑男叵汆�啶掺入法来检测淋巴细胞的增殖;采用流式细胞术分析淋巴细胞的表面分子��,��的表达及细胞因子�.�虸�.�姆置谇榭觥�移酶�����������������础资料。�������痵�畒���
关键词:重组���蛋白,细胞免疫,����馨拖赴�担����峁�允荆喝�蚊庖叩目笻���鞍卓固宓味纫来紊�撸��未次免疫时可达���与��楸冉希琍�.��涣馨拖赴��殖实验结采表明:经���重组蛋白刺激的淋巴细胞能够发生增殖����楸冉希琍�.��煌ü�魇较赴�跫觳饩�刈镠���鞍状碳ず蟮�淋巴细胞为能够分泌��甕、��的��土馨拖赴鹥�%��为检测重组���蛋自的免疫保护作用,我们用�畒�����直鸶腥揪�谌�渭忧棵庖��旌蟮腃��/��螅�诟腥�后次髓起每同计数原虫率和小鼠生存时间。结果显示与对照组相比,重��谛∈筇迥诘脑鲋常�映ば∈笊��时间,提高生存率;但对�畒������诒臼笛橹兄刈镠���白晕�显示出明显的免疫保护作用��。�。为研究重组���蛋白的保护性细胞免疫作用,我们建立了���特异性的�赴�导岸哉兆锽�特异的�О�怠6宰����颐遣捎肧���嘟�泄�堂庖吖セ魇笛椤R訠�特异的�馨拖赴�椤��组为对照组,结果表甓:三组小鼠原虫率均急速上升,原虫率及生存时间组闯比较无明显差异��。�。提示重组蛋白���特异的�赴�废刀訮.����对于��������颐欠直鸩捎寐闶蠛蚇�.��开展了过继免疫攻击实验。��匾斓腡淋巴细胞组、��槲6哉兆椋�闶蠛蚇�.��小鼠实验结果显示:对照组原虫率上升急速,峰值出现早,生存时间短,而���组原虫率上升较为平缓,峰值如现晚,生存时间明显延长��间比较采用�煅椋琍�.��=峁�砻髦刈镠���桶滋匾霤���细胞系能够对感染