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总蛋白标准.doc

上传人:乘风破浪 2019/1/22 文件大小:78 KB

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文档介绍

文档介绍:总蛋白标准(新旧)准确度验证实验一实验目的:通过加样回收率计算,分别以旧标准和新标准为参照,拟定标准曲线,再分别以新标准1mg/ml和旧标准1mg/ml稀释成未知浓度两个低浓度,一个中浓度,一个高浓度样品,(稀释时我们其实是按照标准操作稀释的,、5ug/ml,,15ug/ml,在这次实验中我们当做未知浓度样品来检测),通过加入准确浓度的蛋白标准,进行回收率实验,相互验证新旧标准拟定标准曲线,检测蛋白浓度测定结果与真实值接近的程度。二实验步骤:1旧标准为参照,拟定标准曲线如下::取含量为1mg/ml新标准,分别取25ul,50ul,75ul,150ul,稀释至1ml,分别标记为未知浓度待测样品1、2、3、4,按照考马斯亮蓝测定方法,每个标号样品平行测定两次,结果如下:(计算过程略)名称浓度(ug/ml):分别取新标准蛋白样品1、2、3、,并标号为ABCD,分别加入准确浓度的旧蛋白标准溶液5ug/ml,,10ug/ml,,每个标号样品平行测定三次,结果如下:(计算过程略)名称测的总量ug/ml样品含量()加入量ug/%%%:回收率计算公式为(测得总量-样品含量)/加入量*100%,通常要求95%-105%.4新标准为参照,拟定标准曲线如下::取含量为1mg/ml旧标准,分别取25ul,50ul,75ul,150ul,稀释至1ml,分别标记为待测样品abcd,按照考马斯亮蓝测定方法,每个标号样品平行测定两次,结果如下:(计算过程略)名称浓度(ug/ml):分别取新标准蛋白样品a、b、c、,并标号为Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,分别加入准确浓度的溶液5ug/ml,,10ug/ml,,每个标号样品平行测定三次,结果如下:(计算过程略)名称测的总量ug/ml样品含量()加入量ug/ml回收率OD值均值ⅠOD值