试验二总糖和还原糖的测定.ppt

文档介绍：糖的定量分析---还原糖的测定刘敏-12生命科学学院生物化学实验Why,What,HowTraditionalbiochemistryprinciplesBigData+AnalysisTrue&False一、目的二、原理三、试剂与器材四、步骤五、结果计算六、注意事项七、思考题一、目的:理解还原糖的基本特征,掌握碱性铜试剂法测定还原糖的原理和操作方法二、原理单糖以及含有游离醛基或***基的寡糖,具有还原性,属于还原糖类;多糖和蔗糖等属于非还原性糖(?思考)。利用多糖能被酸水解为单糖的性质,可通过测定水解后的单糖含量对总糖进行测定。还原糖测定的滴定方法有多种,本实验采用硫代硫酸钠间接滴定法(还有其它的滴定方法吗?)。H葡萄糖分子(链式)葡萄糖分子(环式)半缩醛羟基硫代硫酸钠间接滴定法原理:在碱性溶液中,二价铜离子被还原糖还原成一价的砖红色氧化亚铜(Cu2O)沉淀——Fehling’ssolution(1849)氧化亚铜在酸性环境中与定量的过量碘起反应(氧化)成二价铜(蓝色),再用标准硫代硫酸钠滴定剩余的碘,即可算出还原糖的含量。2NaOH+CuSO4=Cu(OH)2↓+Na2SO4COOKCOOKCu(OH)2+H―C―OH=H―C―OH―C―OHH―C―OCOONaCOONaCu+2H2O酒石酸钾钠可溶性的氧化铜络合物(蓝色)COOKH―C―OH―C―OCOONaCuCHO(CHOH)4+2H2O=2CH2OHCOOKH―C―OHH―C―OHCOONaCOOH(CHOH)4+Cu2O↓CH2OH++2葡萄糖酒石酸甲钠葡萄糖酸反应方程式:IO3¯+5I¯+6H3I2+3H2O+Cu2O+I2+HCu+I-+H2O+2+I2(剩余的)+2(Na++S2O3)S4O6+2I-2-2-因此,用硫代硫酸钠滴定剩余的碘,在有已知浓度的标准还原糖浓度时,可以间接地计算出未知样品的还原糖的含量。碱性铜试剂:硫酸铜+草酸钾Fehling试剂:硫酸铜+酒石酸钾钠Benedict试剂:硫酸铜+柠檬酸钠+无水碳酸钠用于尿糖的鉴定,较稳定可长期保存(1911)碱性铜试剂类作用原理相同,络合二价铜离子。稳定性光化学法和电化学法;抽血和非抽血