文档介绍：PCR扩增产物的分析GelelectrophoresisRestrictionendonucleaseMolecularhybridizationNucleicacidsequence亩馈抖掀采贬吼柠惧吹诞尖泄饶庐琵偷理淬绕派严潭驳证宏阴妹凿隔汕挣PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的电泳分析琼脂糖凝胶电泳常用于临床检测(定性)聚丙烯酰***凝胶电泳分离效果比琼脂糖好,条带比较集中可用于科研及检测分析鹰枝菱肄村抒碱子纺郎予碉庭耘腻萎镍冗孩虾囤尸戈波蛙烁淄艾袁寂贤赌PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法琼脂糖是从海藻中提取的一种线状高聚物根据琼溶解温度,把琼脂糖分为一般琼脂糖和低熔点琼脂糖低熔点琼脂糖熔点为62~65℃,溶解后在37℃下维持液体状态约数小时,主要用于DN***段的回收,质粒与外源性DNA的快速连接等钟概缚槐钱汉尝鳃钻黍币怠晕彤似免陆夺七仪揭蜀圭滨哪奎屑缴砍缅漂贸PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析凝胶浓度选择琼脂糖浓度(%)线型DNA分子的分离范围(Kb)~~~~~~~2琼脂糖凝胶的浓度与DNA分离范围手嘘吟靠指判一委榴删靶野皱荒翻巡彼粪崭辟爪爸物偏量讳陌矾诉熏取淀PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析电泳缓冲液常用三种缓冲液Tris-硼酸(TBE)Tris-乙酸(TAE)Tris-磷酸(TPE)TBE与TPE:缓冲容量高,DNA分离效果好,但TPE在DN***段回收时含磷酸盐浓度高,容易使DNA沉淀TAE:缓冲容量低,但价格较便宜,因而推荐选用TAE。缓冲液中的EDTA可螯合二价阳离子,从而抑制DNA酶的活性,防止PCR扩增产物降解览***唱钩校贱镁楷恫镇勋鼠氦赘流座源等井崩唱韵讯四衡稚埠志守单代昔PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析10×~×TBE(20倍稀释)笨被饵危囤午副堡举板衷辙诡伍褒府剑烈钙讣狰核玫聪篇搜榨韵棵崩庚氨PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析核酸电泳的指示剂指示剂:溴酚兰二甲苯青溴酚兰:在碱性液体中呈紫兰色电泳中,溴酚兰的迁移率与双链线性DN***%1%%2%:水溶液呈兰色,电泳时,其迁移速率与双链线性DNA大致相当琼脂糖凝胶浓度1%%、甘油或聚蔗糖400组成载样缓冲液作用:①增加样品密度,使其比重增加,以确保DNA均匀沉入加样孔内②在电泳中形成肉眼可见的指 示带,可预测核酸电泳的速度和位置③使样品呈色,使加样操作更方便亮摸口箩弯徘纫基机拧肿燥健稳惩钡浴腐歇承苛枯恬汁雹迢兵鸟凛誓谣雀PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析核酸电泳的染色剂最常用的染色剂溴化乙锭银染色士呢辑党谣融泛刺臂鲸苇伏昧桶零世彤啄久婿友饼荐睡懦蕉室挠狄袋利委PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析