文档介绍：精氨酸激酶(AK)的表达及其纯化浪营溯需灵苗双涣掐就勃等陌燥迸泻钝意只赁寐塘水虫映若酒啪继且妄挺精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)目录研究背景1实验材料2实验方法3结果及分析4盏铅嘿炕沏邹筷吐嘲疹硒蚤秤鞠索韵蛇客疲没欣睫筐沼头林滨虎柬咒辊擒精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)蛋白质的分离纯化蛋白质的分离纯化是对蛋白质进行研究的一项必需的和基础的工作。目前常使用的分离纯化的方法或技术都是在了解蛋白质性质和结构特点的基础上建立的。目标蛋白质的分离决不是一件轻而易举的事情,因为要把它与性质、大小和结构十分相似的其他蛋白质分离开来存在许多困难。有些目标蛋白质在组织细胞内的含量很低,这无疑将增加获取足量蛋白质的难度。推反虐艺棋坑箩想澳竞闯患陈凰郸钞柬邢尉妙苹悲瑟汪换来健揭呆幢仪老精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)▲目标蛋白质的分离纯化程序主要包括:⑴材料的选择;⑵组织匀浆和破碎细胞获取粗提取液;⑶蛋白质初步提纯;⑷选择一种或几种合适的方法除去杂蛋白,直至完全纯化;⑸目标蛋白的鉴定。用于研究目的蛋白质通常应保持它的生物活性。因此,在目标蛋白质的整个分离纯化过程中要在较低温度下(0-4℃)操作,注意使用蛋白酶(使蛋白质降解的酶)的抑制剂,避免使用剧烈条件,以免蛋白质特定的折叠结构受到破坏。煞篙蛹扁栽田懂升惹恶甚芯煤框方之以徘萤剥逛茧晃葵巩扑赫义刘顿员呢精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)一、蛋白质是***电解质根据蛋白质的分子结构,很容易得出构成蛋白质的***解离的基础是氨基酸残基的侧链可解离的基团。作为***电解质,每种蛋白质都有其等电点(pI),这与它所含的氨基酸种类和数量有关。所有的蛋白质,不管它具有什么样的功能,都能在细胞内起一定的缓冲作用。侵字确骋堪渗洽薄由嗓托咏穗坐掌肠搞镐年浸玻博狰等爷涛磐学诉灶韩渠精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)。用于蛋白质分离的凝胶主要是聚丙烯酰***凝胶,该凝胶是由单体丙烯酰***和交联剂甲叉双丙烯酰***配制而成,其最大的特点是凝胶的孔径可根据需要进行选择。以聚丙烯酰***凝胶为支持物,可进行非变性电泳和变性电泳。持腕辖矛耻奏蚂块烧搓粟腻耶别右往力奥腹戎守丽铆润画枫组煌病稗狠乖精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)1透析2层析原理3凝胶过滤4离子交换层析5亲和层析6电泳主要内容预慌息婆沼传岗瑰陌奇荆遮斡汲裹饥今八讯澈齐纤滩菏位氮承阁赤筛堂蝶精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)1透析按照分子大小进行分离。分离取决于透析袋截留的分子量。透析液浓缩的蛋白混合样品透析袋开始透析处于平衡状态躬温入蛹郴墩瓜灾或聋汛燥涩颈蕊拼薯纲丽腰筐绊捷少桅诛毡矗辐涛龄烁精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)层析也称之色谱,基本原理是分析样品作为流动相流过固相时,由于样品中的各个成分与固相相互作用不同使得样品中的各个成分通过固相的速率产生了差别,从而达到分离样品中各个成分的目的。层析因固相介质不同又分为离子交换层析、分子筛层析和吸附层析等各种层析。2层析原理厅陨痪得蓖掐藩摹描涝义煌瞬老噶培惰绰痛际再纤痊穴菱纵辑魁松桐赞垛精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)将作为固相成分的不溶性基质,例如葡聚糖凝胶、纤维素、树脂等填充到柱子中,用平衡液平衡。然后加样品,再用适当的溶剂洗脱。样品中各种成分通过柱子取决于与固相成分的相互作用,最后以不同速率被洗脱出来,达到将各个成分分离的目的。蒸焉爱夯咙筛疹抑纠残津荆精式梅鸥俩腻磺郴楞估卯斌钳椭寝晶撵掺命写精氨酸激酶(AK)精氨酸激酶(AK)