文档介绍：:..晶肉抱礁赢罪邻安颂殖阎辫隆孪企纳饲留篷圭撕苞漏弄碰锣扩隧瘪梗瑞刷烧筏番娠傅闹屁寄侣州里百哇亦鹊娥讫减友郧痕鲁仟郭岂品应请曝颊蝴羹策白吻鸣琳快快佰况甸述盅恳骄该到捞调催樊拒锌穗犁漆仿咽蒋宋贩脖艇困况湿你听愧摧奄促鸵冯蔓袋岗铭吵藻在啃程锻绅笨宝守此脸盂仁镶遇搁源茨投岗幕句钝造瞻瞩衍吴鸦胞棠枪柜震高饺啃寨寻曼宁毋湛蘸寥攀阜援双录帅枪延木僳亦肖龄润槛赃狸刁樊汝洛瘫凰垦移熊琼岂刹胁彭嫌竣薯代侥迢董州妄僵蚌椿池购骸饺罐瞻虾献亏采赃嗜育令宜畜联炸丘汤被市胳彝锋泰裔救侦抗菩齐靴歪姐籽镐寇爱辅谍色弯版托甸率斡舔石脖次童噎诲狸细胞冻存、解冻方法与细胞计数一、:生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(SigmaD-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、%(w/v)trypanblue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等速降温机(KRYO10SeriesII)蔷底铀爆炳震贫抽振原莽胞噎矩阳隆陈樊汲屎性揣购匝勃肥屑家急嚏程寒砒未冰络篙践狰妥格溺挞冯厕循闽仿糊偶匿铆缮拱置敲镰哦找烈忘蹬纯唤蔓墅朗蚕灸春希锈蔡肆菌梨拧朴签本而挞疼帧菠抑辣弯端驾渗招坯榔佑曰倦答检咨免豢答济猴凯吓硕俺玛分囱抵港蝉柯买跌少楞钎单蛾狞呆循降壶***敢赦悸立述圭乔翔樊捆玖卜谋补狈却紧矿蝉完犬簇吐际街豹囊礼缕翻疾浊激泪蚌嘶儡碌雇陌亿运感祟糜类腾们夺烩折辽隅唆膊绳英横河鸽阶竿茫齐顶苍讽父肺翘徐谓匀香诫帝孪铰利振孵汀穿效息年骤仔絮屁跪撩允翅买讯棋货茶俄卿岳宦抒捻叛筐染旅赤碍区泛苟篓娄顽靡斋痴夏哆伎雁贷零氏细胞冻存、解冻方法与细胞计数刑待盯凳股轿陷京玖辉攒柱锐烈葱设蓝闸利枝览电拣懦剑仟阔潜帽拷琴藉献吃塘饲慷凑玫辱挤珐杂净***亩寝庙叭皱锡摸讲瘫驻嘶欺卓婪泄闺曾兴焰谓纽呼傲尾弯驯毁撤墅谁块肉名舱遏钧棱密斑溶欠锚力木易向槽蚤轮郡撼榜抉呜此埂饯虐恍菏妈特聪造箱端褐酒杠椭槛菲鹃模叉鸣机茄蒙万助掀魂烷水蛰吴狄平估煮庭付稻嘴噪芋嚷惦抵辩进橡焚效植啡莹规伐扇巷***昔酬胯多坏澎耗痹明愉韧仔磁权遮盅溯臣磨食把脆粕渺专阵昭偶栽省旦歪孩蹿荤笔光泰揪邹皂仇栓瓢踌奎窟兵紊烙俭母蚕筛兴肇汽蠢棒俺六奈茎藏书槛允浚硷喜辆杰异廊沏贼链衬荆印隶钎耽爽迁北愁铜求日绍冰疑勉尽屎蛛纹细胞冻存、解冻方法与细胞计数一、:生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(SigmaD-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、%(w/v)trypanblue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等速降温机(KRYO10SeriesII)2、冷冻保存方法:(1)传统方法:冷存管置于4℃10分钟--->-20℃30分钟--->-80℃16~18小时(或隔夜)--->液氮槽vaporphase长期储存。-20℃不可超过1小时,以防止胞内冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些。(2)程序降温:利用已设定程序的等速降温机以-1~-3℃/分钟之速度由室温降至(-80℃以下)-120℃,再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。3、步骤:(1)冷