实验4 乙醇酸氧化酶测定.doc

文档介绍：实验四乙醇酸氧化酶活性的测定一、实验目的熟悉测定乙醇酸氧化酶活性的方法。二、实验原理乙醇酸氧化酶在光呼吸作用中起重要的作用,在它的作用下将乙醇酸氧化生成乙醛酸和过氧化氢,反应如下: 乙醛酸和苯肼反应生成乙醛酸苯腙,盐酸、苯肼和铁氰化钾反应生成重氮盐,乙醛酸苯腙和重氮盐反应生成偶氮化合物(红色),通过测定偶氮化合物的OD值检测乙醇酸氧化酶的活性。三、实验材料菠菜、油菜四、试剂与仪器设备苯肼,铁氰化钾,磷酸缓冲液,乙醇酸,三氯乙酸;分光光度计,离心机,研钵,移液管,烧杯,脱脂棉,天平,试管架,漏斗,试管。五、实验步骤称取新鲜菠菜叶和油菜叶各1g,加入10ml磷酸缓冲液,研磨后用脱脂棉过滤。,28℃保温30min。,2000转/min离心5min。,放置5min,加入盐酸2ml,。500nm波长下读出OD值。六、实验结果七、思考题试比较C3植物与C4植物酶活性的差异。乙醇酸氧化酶在光呼吸作用中的意义。