文档介绍：:..高中新课标生物必修三知识点总结专题一基因工程(基本原理:基因重组)基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品乂叫做DNA重组技术。把外源基因转入生物体内,能有效的打破物种界限,定向的改造生物的遗传性状。-、“分子手术刀”1、 名称:限制性核酸内切酶,又称限制酶。2、 来源:从原核生物中分离纯化的(真核生物也有)。3、 特点:识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列;并且有唯一切点(指每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键)。4、 识别序列大多数限制酶识别序列由6个核苷酸组成(EC01U、Sinai);也有少数酶的识别序列由4、5或8个核苷酸组成。5、 八段末端:两种形式一一黏性末端和平末端。二、 “分子缝合针”1、 名称:DNA连接酶2、 來源:从大肠杆菌中分离得到的,。从L噬菌体屮分离得到的,为LDNA连接酶。3、 特点:恢复两核苷酸间的磷酸二酯键。4、 区别:。T.,DNA连接酶可连黏性末端又可连平末端。三、 “分子运输车”1、 载体:质粒(在天然质粒的基础上经过人工改造的)、A噬菌体的衍生物、动植物病毒。2、 质粒:细菌细胞内独立于拟核DNA之外,裸露的、结构简单并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。3、 作为载体的条件:(1)能够在受体细胞内自我S制,或整合到染色体DNA上,随着染色体DNA进行同步复制,并在宿主细胞内稳定保存。(2)有一个到多个限制酶切割位点,供外源DN***段插入其中。(3)具有特殊标记基因,供重组DNA的鉴定和选择(四环素抗性基因,氨苄青霉素抗性基因)。四、DNA连接酶与DNA聚合酶DNA连接酶DNA聚合酶连接DNA双链单链连接部位在两个DN***段之间形成磷酸二酯键将单个核苻酸加到已存在的核酸片段的3’端的羟基上,、目的基因的获取1、方法.•(1)从自然界中已有的物种中提取出來。(2)人工合成的基因:基因较小,核背酸序列已知,通过DNA合成仪或用化学方法直接人工合成。(3)从基因文库中获取目的基因:①基因文库:将含有某种生物不同基因的许多DN***段导入受体菌的群体中储存,各个受菌分别含有这种生物的不同的基因。②部分基因文库(cDNA文库不含启动子):只包含了一种生物的一部分基因。③操作:根据i的基因有关信息(核打酸序列,基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA,以及基因的表达产物蛋白质等特性)来获取。④特点:操作简便,但工作量大,具有一定的盲目性。(4) 利用PCR技术(聚合酶链式反应)扩增目的基因:①原理:DNA双链复制的原理。②前提:要有一段己知目的基因的核苷酸序列,并根据这一序列合成引物。③过程:a0的基因的DNA受热变性后解链为单链。b引物与单链相应互补序列结合,在DNA聚合酶(Taq酶)的作用下延伸。c重复循环多次。④优点:可以在短时间内大量扩增目的基因(成指数形式扩增)(5) PCR技术与DNA复制比较术技PCR制复NAD相同点制a的DNA料原\)zT,C,G,Az(\酸苷核氧脱白离游种pq件条酶原模PT>A不同点式方旋解旋解性变温«旋解酶旋解漏内核胞细要±-酶酶合聚}NA酶DQ性Ta定<稳热^每含A^SJVDN合馳聚刪果结的大賊段邮片P短在分NAD个子整成形二、基因表达载体的构建1、 基因表达载体的构建是实施基因工程第二步,也是基因工程的核心。2、 使目的基因在受休细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用。3、 表达载体组成:复制原点+目的基因+启动子+终止子+标记基因①启动子:是一段有特殊结构的DN***段,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所谣要的蛋白质。②终止子:也是一段有特殊结构的DN***段,使转录在需要的地方停止下来。③标记基因:为了鉴别受体细胞中是否有目的基因,将含有目的基因的细胞筛选出来(如抗生素抗性基因)。④复制原点:幵始复制的地方。三、将0的基因导入受体细胞1、 转化:H的基因进入受体细胞内,并在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、 方法:(1) 将H的基因导入植物细胞:①农杆菌转化法:a能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物,而对大多数单子叶梢物没有感染能力。b转化:目的基因插入Ti质粒的T-DNA—进入农杆菌—导入植物细胞一稳定维持和表达。②基因枪法(单子叶植物,成本高)。③花粉管通道法(普遍经济)。(2) 将目的基因导入动物细胞:①方法:显