文档介绍：:..ABO和Rh(D)血型鉴定操作规程(盐水法)一•目的规范ABO/Rh(D)血型鉴定的操作流程;保证临床用血的安全性及有效性。(D)(D)-A、抗-B、抗-D试剂、A、B、0型反定型试剂红细胞、生理盐水、小试管、滴管、患者血标本。、显微镜、血型血清学专用离心机。,使标本血浆/血清与红细胞分离,并吸取红细胞配制3%悬液。,分别标明-A、抗H3、抗-D,用滴管分别加抗-A、抗-B、抗-D试剂各2滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者3%红细胞悬液1滴,混匀。,分别标明A、B、0细胞,用滴管分别加入受检者血淸2滴于试管底部,再分别以滴管加入3%A、B、0型试剂红细胞悬液1滴,混匀。。,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集(或溶血)现象,如肉眼不见凝集,应将反应物倒在玻片上,再以显微镜检查。(见下表):ABO血型结果判断分型试剂+受检者红细胞(正定型)受检者血清+试剂红细胞(反定型)抗-A 抗-B A细胞B细胞0细胞血型+——+—A—++—B——++—0++———AB注:“+”凝集;“一”(D)血型判定:红细胞与抗-D试剂凝集为Rh(D)阳性无凝集力Rh阴性。:4+红细胞凝集成一火块,背景清晰透明;3+红细胞凝集成数小块,背景尚清晰;2+红细胞凝块分散成许多小块,背景可见到游离红细胞;1+肉眼可见大颗粒,周围有较多游离红细胞;士镜下可见数个红细胞凝集在一块,周围右许多游离红细胞;混合外观凝集(MixedField,MF)是指镜下可见少数红细胞凝集,而绝大多数红细胞仍分散分布;-(阴性)镜下未见凝集,红细胞均匀分布。(除谱细胞外)每次使用前必须与相对应的红细胞和血清做阳性、阴性对照,以检测其活性。,更要注意凝集强度,此有助于A、B亚型、类B或Cis(顺式)AB的发现。,因此正反定型的结果应该一致。正反定型起到一个互相验证和质控的作用。只有正反定型结果相符才能正确判定ABO血型。。原因是亚型患者细胞上A或B抗原很弱,通过正反定型易于发现二者结果不一致,从而引起警惕。,则需进一步鉴定。可在止定型试验中增加抗-A1、抗-AB及抗-11;反定型试验中增加A2、0及自身细胞。正定型试验中的抗-AB是用来确认弱A和弱B抗原,抗-A1用来鉴定A亚型,抗-H用于鉴定亚型及孟买型;反定型试验中的A2细胞用于鉴定A2亚型,0型细胞用于鉴定是否存在ABO系统以外的同种抗体影响型,自身对照用于鉴定是否存在自身抗体影响定型。如果是0型细胞或自身对照为阳性,则定型结果不可靠,必须进一步进行血型鉴定。:(1)新生儿尚未形成