文档介绍：转自:l/,最关键的一步便是蛋白质的提取。在提取的过程中,我们要经常加入以防止。另外在磷酸化蛋白的研究过程中,也是必不可少的。本文详细总结了常用的PMSF、Leupeptin亮肽素、Aprotinin抑肽酶、Pepstatin胃、EDTA-Na2等以及NaF***化钠、Na3VO4原矾酸钠、Beta-glycerophosphate甘油磷酸钠、Na2P2O4焦磷酸钠等的溶液配制、贮存液与工作液浓度及保存条件。一、蛋白酶抑制剂PMSF:特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂,如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和凝血酶,也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶。溶解性:溶于异丙醇、乙醇、甲醇和丙二醇里>10mg/ml。在水溶液中不稳定。在100%异丙醇,25℃时稳定至少9个月。分子量::贮存浓度200mM,工作浓度1mMLeupeptin亮肽素特性:抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤溶酶和组织蛋白酶B。溶解性:高度溶于水(1mg/ml)。4℃一周稳定,分成小份,冷冻在-20℃至少6个月。分子量:C20H38N6O4×1/2H2SO4:×H2O::贮存浓度1mg/ml,(1mM)。Aprotinin抑肽酶特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂,抑制纤维蛋白溶酶、激肽释放酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶的高活性。不抑制凝血酶或因子X。溶解性:易溶于水(10mg/ml)或缓冲液(,)。pH约7~8的溶液在4℃可保存1周,分装保存在-20℃可至少保存6个月。避免反复冻融,pH>。分子量:6,512使用:贮存浓度1mg/ml,~(~)。Pepstatin胃蛋白酶抑制剂特性:抑制天冬氨酸(酸)蛋白酶如胃蛋白酶、肾素、组织蛋白酶D、凝乳酶、许多微生物酸性蛋白酶溶解性:溶于甲醇约1mg/ml;可溶于乙醇,过夜溶解可达到1mg/ml;在6当量乙酸中溶解度为300ug/ml。4℃稳定一周,分装储存于-20℃时可保存1个月。分子量::贮存浓度1mg/ml,(1μM)。EDTA-Na2特性:金属蛋白酶抑制剂溶解性:,在pH8-9的条件下,4℃稳定至少6个月分子量::~(~),不需现用现配,在溶液pH值调至8~9时再加入。二、NaFNaF是针对pSer/Thr***化钠溶解性:溶于水分子量:4