延胡索有效部位提取工艺研究.docx

文档介绍：延胡索有效部位提取工艺研究【摘要】目的:改进延胡索总生物碱的提取方法,寻找延胡索总碱最佳提取工艺。方法:采用正交优选法,以延胡索乙素为检测指标,采用高效液相色谱法测定延胡索乙素含量。结果:酸碱度对延胡索乙素的得率有极显著的影响。结论:采用碱性甲醇提取最佳。【关键词】延胡索;延胡索乙素;HPLC;提取工艺;含量测定延胡索Corydalisyanhusuo具有活血化瘀、理气止痛功效,其主要活性成分为生物碱,其中以延胡索甲、乙、丑素等为主[1]。延胡索甲、乙、丑素等有较好的镇痛作用,以乙素作用最强[2],其总生物碱具有抗溃疡、抑制胃酸分泌、解痉及增加冠脉血流量,抗心律失常等作用[3]。控制延胡索的质量,多以延胡索乙素作为首选成分。本文采用正交试验设计,经高效液相色谱法(HPLC)测定延胡索浸膏中延胡索乙素的含量,选出提取延胡索的最佳工艺条件。1仪器与试药日本Shimadzu公司LC6A高效液相色谱仪,CR6A数据处理仪,日本Shimadzu公司AUE210电子天平(1/10000);所用试剂均为色谱纯,水为自制超纯水;延胡索乙素对照品(中国药品生物制品检定所),延胡索药材由天津市中药饮片厂提供。,考察提取溶媒及提取溶剂的酸碱度等因素,设计了2因素3水平的正交实验,以考察延胡索最佳提取工艺,因素水平见表1。正交实验结果见表2。表1因素水平表与对照组比较##P<表2正交实验结果注:由试验结果看出:A3B3为最佳提取工艺参数。.2样品制备[4-5]称取延胡索150g,加提取溶媒(1500mL,h;1200mL,h)回流提取,过滤(100目),滤液合并,减压浓缩至稠膏,水浴蒸干。.[6-7]色谱柱:SpherisorbC18柱(250mm×,10μm),流动相:甲醇∶水(乙二胺调)为65∶35,流速:1mL/min,检测波长:280nnm,进样量:1μL。.对照品溶液的制备精密称取干燥至恒重的延胡索乙素对照品mg至50mL容量瓶中,甲醇溶解定容,摇匀,制成/mL的对照品溶液。.标准曲线制备分别吸取对照品溶液3,6,9,12,1μL按上述色谱条件测定峰面积。以对照品量为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。得回归方程y=+x,r=,表明延胡索乙素在μg间呈良好线性关系。.精密度试验精密吸取对照品溶液20μL重复进样6次,测峰面积,结果RSD为%。.重复性试验精密称取样品,按样品含量测定方法处理,在相同条件下测定同一批号6份,计算含量,结果RSD为%。.稳定性实验取延胡索乙素对照品,在0,,1,3,5,7和2h分别测定,结果RSD为%,表明样品在2h内稳定。.加样回收率试验采用加样回收法,精密称取已知含量的延胡索样品1g,分别精密加入适量延胡索乙素对照品溶液,按项下操作,结果平均回收率为%,RSD=%。.样品的含量测定精密称取样品,置锥形瓶中,加入苯20mL,乙二胺1滴,超声处理20min,过滤,挥干溶媒,残渣加入mol/LHCl10mL溶解,μm微孔滤膜过滤,精密吸取滤液1μL注入色谱仪,3次测定结果平均值为%。、溶媒对延胡索乙素得率的影响本实验结果表明,溶媒的酸碱度对延胡索总碱中延胡索乙素含量的影响有极显著的意义,延胡索总碱的最佳提取方法