文档介绍：液相色谱基础知识2017年04月11日一、什么是色谱色谱是一种分离工具,而不是传统意义上的分析仪器。色谱法也叫层析法,它是一种高效能的物理分离技术,将它用于分析化学并配合适当的检测手段,就成为色谱分析法。常见的分离方法:蒸馏、离心、电泳、过滤、超滤、等等。色谱法的发明人:俄国科学家:、什么是液相色谱呢液相色谱:流动相是液相液相色谱柱色谱纸色谱HPLC薄层色谱三、什么是高效液相色谱HighPerformanceLiquidChromatography高效液相色谱法,简称:HPLC是一种区别于经典液相色谱;基于仪器方法的高效能分离手段。具有高性能的色谱柱,高精度、耐高压的输液泵以及高灵敏度的检测器。HPLC的分离原理、仪器配制和工作流程分离原理动画演示溶剂色谱泵进样器HPLC色谱柱检测器废液数据处理系统请单击请单击请单击请单击请单击四、高效液相色谱法的特点“三高一广一快”:①高压:对载液加高,流动相能迅速通过色谱柱压.②高效:分离效能高。③高灵敏度:,进样量在uL数量级。④应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析。⑤分析速度快:较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15—30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。五、高效液相色谱法的主要类型及原理1、液-液分配色谱2、液-固吸附色谱3、离子交换色谱4、离子对色谱5、离子色谱6、排阻色谱7、亲和色谱(AC)1、液-液分配色谱固定相与流动相均为液体(互不相溶);基本原理:组分在固定相和流动相上的分配;流动相:对于亲水性固定液,采用疏水性流动相,即流动相的极性小于固定液的极性(正相normalphase),反之,流动相的极性大于固定液的极性(反相reversephase)。正相与反相的出峰顺序相反;固定相:早期涂渍固定液,固定液流失,较少采用;化学键合固定相:将各种不同基团通过化学反应键合到硅胶(担体)表面的游离羟基上。C18柱(反相柱)以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。反相高效液相色谱法即指流动相的极性大于固定相极性的色谱方法。在本法中常采用化学键合相作为固定相,流动相采用水—甲醇或水—乙***系统,在反相色谱中,极性强的组分在分离时先流出柱子,极性弱的组分后流出。因此适合于共存组分极性差异较大的样品分析。乙***(jīng)乙***又名******,,无色透明液体,密度小于水,,能与水和乙醇等有机溶剂以任意比混溶,易燃,有毒性。