文档介绍：石河子人学2004届硕士学位论文 徐海霞 芨芨草遗传多样性研究芨芨草遗传多样性研究姓 名:徐海霞(作物遗传育种专业)导师姓名:曹连莆教授张霞教授摘 要芨芨草Achnatherumsplendens(Trin.)Nevski属盐生旱中生植物,适应性强,耐盐碱、耐瘠薄、抗寒早,抗病虫。根系发达,是改良盐土、防风固沙和水土保持的重要野生资源;青叶适口性好、营养价值高,是良等牧草;茎杆是优质造纸原料和民间常用编织原料。RAPD分子标记技术自1990年创立以来,广泛地应用于遗传多样性检测、起源进化研究、遗传连锁图谱构建等方面的研究。由于RAPD技术不需要对所研究物种的分子遗传背景有所了解,扩增在基因组DNA水平上随机进行,所检测的位点随机分布,因而可以更客观地说明群体遗传多样性水平。,利用RAPD技术研究芨芨草居群内与居群间的遗传多样性,探讨形态变异与环境之间的关系,遗传变异与居群地理位置、授粉方式、种子传播方式等物种特性之间的关系;同时对RAPD分子标记技术在芨芨草上的研究方法(包括DNA提取,反应体系优化)作一探讨,为芨芨草居群遗传学的研究作一前期工作。本研究包括以下主要内容:、种宽、两颖长、芒长作级差、平均值、标准差、变异系数分析,利用DPS软件作出7个不同地理种源芨芨草形态上的聚类图,结果发现:霍城居群、奎屯居群、和静居群和奇台居群聚为第一类,芒长最短,第一颖与第二颖也是最短;北湖居群单独聚为第二类,芒长位于第一类居群和第三类居群之间,两颖是最长;布尔津居群和石河子152团将军tJl居群聚为第三类,芒长最长,第一颖长与第二颖长位于第一类居群和第二类居群之间。表明:芨芨草小穗、种子外形特性与地理距石河子人学2004届硕士学位论文 徐海霞 芨芨草遗传多样性研究离之间没有相关性,而于采集点生境直接相关。(1)对芨芨草基因组DNA的2种提取方法进行比较,选出适合干、鲜材料进行RAPD分析的方法,CTAB简单提取法。(2)对RAPD反应体系中的一些重要参数进行优化,包括模板浓度、Mg“、dNTP、引物,建立适合芨芨草RAPD分析的PCR反应体系。-L~MgCl,-L“dNTPs,,20ng模板DNA,。反应程序为:前5个循环为95。C变性30s,35。C复性45s,72。C延伸80s,后36个循环为94℃45s,36℃40s,72℃70s,最后72℃延伸10min。该反应体系具有良好的稳定性和重复性。(1)从60条引物中筛选出18条引物,扩增出162条带,作为7个居群间遗传多样性分析,%。遗传聚类表明:在天山以北的石河子两个居群、奎屯居群、奇台居群、布尔津居群聚为第一类,位于天山主脉和侧脉之间的霍城居群聚为第二类,天山以南的和静居群与其它居群相差较远,聚为第三类。遗传上的聚类与地理位黉直接相关。植物居群间的遗传分化与其地理位置、分布范围、繁育系统、种子传播方式有关,即植物居群的传粉方式和种子传播方式越是有利于居群间的基因交流,植物居群间的遗传分化越小。石河子的两个居群地理位置最近,因此基因间的交流越频繁,这与芨芨草为异花授粉、风媒花的特性有关。(2)从60条引物中筛选出16条引物,在石河子152团将军山居群内(A6)扩增出125条带,%,在石河子北湖居群内(AT)扩增出147条带,%。在石河子的两个居群中,北湖居群处于轻度盐碱环境,将军山居群处于湿润的山脚下,生态环境比北湖居群更利于植物生存,但多态带的比率却小于北湖居群,遗传变异的水平比北湖低。遗传多样性是植物长期进化的结果,同时代表植物的进化潜力,体现植物对生存压力的一种适应性策略,即物种在不利于生存的环境条件下进化并积累较多的遗传变异,以适应各种可能的环境压力。关键词:芨芨草:遗传多样性;RAPD论文类型:A(基础研究)icDiversityofAchnatherumsplendens(Trin.)NevskiAchnatherumsplendens(Trin.)Nevskibelongstosaltcatchplant,hasagoodadaptability,bearssalineandbarren,resistsdrought,,fixingsandandconservatingsoil,NutritionisgoodStemi