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寡聚核苷酸电化学生物传感器-光学专业论文.docx

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上传人:wz_198613 2019/3/6 文件大小:2.30 MB

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文档介绍

文档介绍:南京邮电大学学位论文原创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得南京邮电大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人学位论文及涉及相关资料若有不实,愿意承担一切相关的法律责任。___________研究生签名: 日期: _南京邮电大学学位论文使用授权声明本人授权南京邮电大学可以保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子文档;允许论文被查阅和借阅;可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索;可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。本文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。论文的公布(包括刊登)授权南京邮电大学研究生院办理。:_______________________涉密学位论文在解密后适用本授权书。研究生签名: 导师签名 日期:_ _摘要随着社会发展,人们对医疗健康的要求越来越高。本论文组建了新型有效的寡聚核苷酸电化学传感器,为疾病相关的分子诊断和药物筛选提供平台。第一章介绍了电化学分析的主要方法,并对寡聚核苷酸的电化学传感器进行了总结和分类,概述了它的发展趋势。第二章讲述一种检测DNA去***化酶活性的E-DNA传感器。采用半***化的茎环结构DNA作为探针,探针DNA末端标记二茂铁乙酸(FcA)。半***化的DNA可以被去***化酶识别和去***化,随后被限制性内切酶BstUI酶切,电极表面FcA的DPV信号明显降低。通过电化学信号的变化,检测DNA去***酶的浓度。该方法获得了令人满意的灵敏度,为去***酶活性的检测提供了一个灵敏而有效的新平台。第三章讲述基于双链特异性核酸酶(DSN)目标循环放大、链霉亲和素—金纳米粒子放大和辣根过氧化物酶催化放大的三重信号放大策略而设计的新型miRNA电化学传感器。巯基修饰的探针DNA(pDNA)通过Au-S键自组装至金电极表面。当目标miRNA-21存在时,探针DNA和miRNA-21杂交,DSN剪切已杂交的探针DNA,释放出miRNA-21循环与探针DNA杂交。当DSN反应结束后,信号DNA(sDNA)通过与剩余的pDN***段杂交,固定在电极表面,链霉亲和素—金纳米粒子(SA-AuNPs)和生物素—辣根过氧化物酶(Biotin-HRP)层层组装,电极表面聚集大量的HRP,有效催化了TMB介导的过氧化氢的还原,提供了较大的电化学响应电流,该方案为检测痕量miRNA提供了新思路。第四章制备并利用三维多孔氧化石墨烯—二茂铁纳米复合材料,构建了过氧化氢电化学传感器。实验结果表明,该纳米复合材料对过氧化氢具有良好的电催化性能。关键词:寡聚核苷酸,电化学,生物传感器,DNA***化,miRNAIAbstractWiththedevelopmentofthesociety,,afacileelectrochemicalDNA(E-DNA)-DNAsensorisfabricatedbyahemi-methylatedstem-loopstructureDNAwithaterminuslabeledwithferroceneaceticacid(FcA)-methylatedDNAcanbedemethylatedbydemethylaseandthenrecognizedandcleavedbyBstUIendonuclease,,theDNAdemethylationlevelc