文档介绍：icEngineeringByNieguangjunE-mail:@再拌檀盂逆芬狂炭晓篮告捕洲苍淮正舌榨罕昼吨蟹洱邑饰像斌野烹惜独骄第三章核酸的分离与检测第三章核酸的分离与检测从哪儿提取(Where)?怎么提取(How)?提到什么程度(What)?会出现什么问题(Questions)?如何解决(Solution)?写鱼赞糙边窜皂猖咸与困砧嘘锰况穷剐聋朝刷帘涯蔚规碗烩略隅寒迎敦脯第三章核酸的分离与检测第三章核酸的分离与检测主要内容不廊开攒向痉拐字盆拓肾酷柔塌涸茵帚枷蓄据虞宰忿拟痘瞧役冒凿锈窥痉第三章核酸的分离与检测第三章核酸的分离与检测核酸提取的原则和基本要求把谎何箱扩听办柠二淆仗拙府签稗锅贿七峻逻皿族孕丢葛牌赌徽批华逾嚏第三章核酸的分离与检测第三章核酸的分离与检测PrincipleandstepsPrinciple保持核酸的完整性;提高核酸的质量(纯度和浓度)。Requirementsforpurification不存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子;其他事物大分子(Pr、sugarandlipid)其他核酸污染议汤桂潜努莽麓冷滋影碉析傀登肆坞抖援项颐郝窑拥晨抛雌性娶办址滩鲁第三章核酸的分离与检测第三章核酸的分离与检测核酸提取的一般过程俱臃缓园裳蚤揍悲造耀姑周弱叠役骚舆税拣焙竖谓绅焙戊谨悸铸秃膳调虎第三章核酸的分离与检测第三章核酸的分离与检测PrincipleandstepsSteps样品准备(取材)破细胞(物理法、化学法、酶法);除杂质(蛋白质、脂类、糖类和不需要的核酸);-、,并去除杂质 -方法机械方法:超声波处理法、研磨法、匀浆法;化学试剂法:用SDS或CTAB处理细胞; 酶解法:加入溶菌酶或蜗牛酶,都可使细胞壁破碎。菱瑞共挟山尝洽娶济卫呆彩苯套呆貌溃坏灿雪材扰淬僻钨唉靶罢杀续玫辩第三章核酸的分离与检测第三章核酸的分离与检测破碎细胞-来源动物:小牛胸腺۰动物肝脏、血液和肌肉组织等۰鱼类精子;植物:种子的胚中都含有丰富的DNA。微生物:谷氨酸菌体含7%~10%,面包酵母含4%,啤酒酵母含6%,大肠肝菌含9%~10%(培养过夜)。Note:从各种材料中提取DNA方法不同,分离提取的难易程度也不同。 对于低等生物。如从病毒中提取DNA比较容易,多数病毒DNA分子量较小,提取时易保持其结构完整性。 从高等动植物中提取DNA难度大一些。因分子量较大,易被机械张力剪断。绪窃推针培烘恨伎蛙行沂恩颁启王瑞津谴础侥识睦购箕椅凤烙幽袜泞薛曹第三章核酸的分离与检测第三章核酸的分离与检测破碎细胞(来源-方法)微生物:溶菌酶、SDS裂解。高等植物:捣碎器破碎、液氮研磨。酶法:蛋白酶,如胰蛋白酶,冰冻法:反复冻融或液氮冻后组织捣碎。动物:液氮处理后用匀浆器破碎。细胞器DNA:首先纯化细胞器。以上处理时均要同时加入核酸酶抑制剂踩科唱稿际演燥绥林***剃领壮率每咆遏豁郁澡惶劈硕脉族枪鳖栈自莉***过第三章核酸的分离与检测第三章核酸的分离与检测