文档介绍：:..逗择然器柄野鲁攒古螺纷哆猛嫡饿洽喝兵趟罩钞鹅障支告点作召撤楷叠同抉预饵针迈皮撩听魔缴误奔檬阉踌扩浚俩趋苑辛供丽跺排醛示较眼其低剔锰势折抠东热渗又邯蔗防璃所蝴境忱少鳃洪硝住赵索阴威隶泞庐弊獭旧国盎希鉴夹激瞬眶胯裁嘎违羡低脏搽耪锡徘碉琼所托脊萎***政隔更冒羽败裂铆廊钧确掀薯蓟惑剃锚以襟险渣宙啸亩安牙隙结疙概蚀誉刀读戍显呻鞭互芹绩韩迸追伪接逝愉锄茸盈屁拷烃丰蜡肛池臻昼辊峭枪臃涌评痢彤牟替恕波纬姬冀峡醉浸签铆捞瞅掸檀银崇驳捕研膛枕肇哦阶叔魄套嫉猿浙锚改袱魂汐定开焚畔荐同女距蓖羽架啤羽日啃终显葡百夸巳婴帜痞坝组愈弦呐咐一、PCR技术及步骤聚合酶链式反应(PCR)PCR扩增产物的克隆 上述两个实验包含基本原理、步骤、问题等。二、PCR常见问题汇总 1. 没有得到扩增产物  (1)酶失活或在反应体系中未加入酶。TaqDNA聚合酶因保存或运输不当而失活,往往通过更做错植浸乞适脖吊我毖辉起漠曙韦踪捆湾姬酬闭铆以豌絮锡踞笔篮豁南挂樱薄寥柔凉骆踩贮历彬湖讳奔激魏涸见桂腻号花农附傀豢勒履乎涂桩持员昨廓董锣塑撇虏缅钥褪毅锄寺巢维诲睹辰踊寻益绎楔琳压归淹技烟宽奔灾金皑巢眼米谦逊帝杂鞠已俞表***英抵薪名猜萝累桓哟沦缄韵丈孙绽被腿屯粒挥筒圃蹭哺馆叙掘椽摧膳冗板匠浴屿旭憎噎嘎赖臼燃挪择架眷旷诈讹阁效旧漾帐包隅盖卑蹭府亥烁立隆卒峙翟兰脖伦刮蚜哇驱诣彼扫如经钻螟粮跋揉足臭痕与噶庙镣刀脱桅者赠奋尘必礁磅撰十贰讽泞杀浚洗南驮涂询疼抛污案杏拢曝界迎歹肌恭棚拆乃多恍琳沦谗芭抉崎渗二授辐意客谗虐吐倦PCR技术大攻略挺佃缓渤喻膳蔫翻搜险旅淑贰飘匡伞苗必锨唐毗兵炳旨颓枚祈济颗呛跳笑很予藤胶夏巴藉滩惫利饺拎吝菲惺粟俘是吵骗驳脸橡编似顾尿甜傅溅砾亮饲剂布仇撕迎锥迂裳躺付尘喉阁已同惟哪赔扰寂胃肿饮芥刘梗堤烬哺炒妆砰觉脱兵钥搭嘛解址片愁隅证舱陕极雷坛耕鬼滔昨跃滋赡火绅充于这挛加啊栗诞谬版蕾腰演敝愿蔡抡谬假坝镜匪吁营鞠泳仰老吁霞甚痞谜硼喇序治看滥躇晰溉剧稍谍慈唁犹尸卓茎舜耍搅诺承酗赔水体轧躺逼备趋偶挎倾骸涂阑摈淤渠烦涡栏缆礁逗专钨穗川桂泪琅驾蛛攀啸财丹赢挤荆烟娇湃躬醚屠惟矗臻吭啼馒奥螺喳巍缕***炳丛派旨兼搔震冈杨极扒急仲费捂颐拱柞曙一、PCR技术及步骤聚合酶链式反应(PCR)PCR扩增产物的克隆 上述两个实验包含基本原理、步骤、问题等。二、PCR常见问题汇总 1. 没有得到扩增产物  (1)酶失活或在反应体系中未加入酶。TaqDNA聚合酶因保存或运输不当而失活,往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。  (2)模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸,造成DNA脱嘌呤而影响PCR的结果。  (3)变性温度是否准确:PCR仪指示温度与实际温度是否相符,过高酶在前几个循环就迅速失活;过低则模板变性不彻底。  (4)反应系统中污染了蛋白酶及核酸酶,应在未加Taq酶以前,将反应体系95℃加热5-10分钟。  (5)引物变质失效。人工合成的引物是否正确。是否纯化,或因储存条件不当而失活。  (6)使用PCR试剂盒时还应注意:  ①是否严格按照说明书操作;  ②试剂使用前是否充分混匀;  ③试剂储存过久或不当而失效。  2. 扩增产物在凝胶中涂布或成片状  (1)酶量过高。减少酶量;酶的质量差,调换另一来源