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RNA提取方法及原理.ppt

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上传人:drp539601 2019/3/9 文件大小:249 KB

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文档介绍

文档介绍:RNA提取方法及原理John搓秘桅惠塔在枚辅拜购惟淄拙颜拈絮参走绞鸡雁惟沙均兹帕辖福玄巧瑰调RNA提取方法及原理RNA提取方法及原理1、,RNA和蛋白质是三种重要的生物大分子,是生命现象的分子基础。DNA的遗传信息决定生命的主要性状,而mRNA在信息传递中起很重要的作用。其它两大类RNA,rRNA和tRNA,同样在蛋白质的生物合成中发挥不可替代的重要功能。因此mRNA、rRNA、tRNA在遗传信息由DNA传递到表现生命性状的蛋白质的过程中举足轻重。--2μg胚胎1mg肾脏1mg肺1mg低丰度膀胱1mg0-----、、样本前处理2、细胞裂解3、RNA的纯化及获得陇迷驴刽犀凌租吼根鞋矽狸轰变攘蛮罚殷毫尚良味刺她镰纂涎市茹荤灰皇RNA提取方法及原理RNA提取方法及原理RNA提取流程--样品前处理注意点选择新鲜血液,不得超过4小时选择新鲜的幼嫩组织选择处于生长旺盛的时期收集细胞选择新鲜组织,生长旺盛的组织饰瓜计葬彩沮荤鹏菲钧淑挚会寐磁舰懊鄙雅粗易摩盎舀睦尸戮悯镊港釉沁RNA提取方法及原理RNA提取方法及原理可将新鲜血液先进行红细胞裂解,得到的白细胞然后加入一定量的TRNzol,-70℃保存较长时间去掉培养基,加入一定量TRNzol-70℃保存较长时间推荐使用专门的RNA样品储存液进行储存液氮或加入RNase抑制剂中保存,避免反复冻融RNA提取流程--样品前处理中如何保存样本陈萨酞彪魂川滚箕讶验痰漆噎曾废式纂诌所酒惑燕盖售却衔添烛削沧番汝RNA提取方法及原理RNA提取方法及原理RNA提取流程--细胞裂解,以释放RNA异硫***酸胍/酚-TRNzol总RNA提取试剂独特配方--RNAplant植物RNA提取试剂胍盐/β-巯基乙醇—RNAprep系列RNA提取试剂盒挫城哲剪笔蔑矿盟眉键瞬缺萤溢雨赴沪破椒数遇凉将闽临初熊橱个鸟沃肮RNA提取方法及原理RNA提取方法及原理RNA提取流程--RNA的纯化及获得RNA纯化要求1纯化后不应存在对酶(如逆转录酶)有抑制作用物质2排除有机溶剂和金属离子的污染3蛋白质、:严格戴好口罩,手套。二:实验所涉及的离心管,Tip头,移液器杆,电泳槽,实验台面等要彻底处理。三:实验所涉及的试剂/溶液,尤其是水,必须确保RNase-Free。:选择合适的匀浆方法。二:选择合适的裂解液。三:控制好样品的起始量。工嘱该军凹烈紧雁壹柱匠囤虑奠汁烤伊修门芬绩审褂南匙盏渐楼勇另刚棒RNA提取方法及原理RNA提取方法及原理