文档介绍：中学生物实验教学
综合实验3
四川师范大学生命科学学院张小勇
【实验3-7】
观察DNA和RNA在细胞中的分布
生物教学论实验四川师范大学生命科学学院张小勇
【目的原理】
染色剂
染色颜色
主要存在部位
DNA
RNA
吡罗红
***绿
红色
绿色
主要在细胞核,线粒体、叶绿体含少量
主要在细胞质
生物教学论实验四川师范大学生命科学学院张小勇
【实验准备】
人的口腔上皮细胞大烧杯,小烧杯,温度计,滴管,消毒牙签,载玻片,盖玻片,铁架台,石棉网,火柴,酒精灯,吸水纸,显微镜
%的NaCl溶液,质量分数为8%的盐酸,吡罗红***绿染色剂,蒸馏水
生物教学论实验四川师范大学生命科学学院张小勇
【安全事项】
①用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来回移动,使载玻片均匀受热,以免破裂
②烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中,最好先自然冷却1分钟
生物教学论实验四川师范大学生命科学学院张小勇
【实验方法步骤】
取口腔上皮细胞制片
水解
冲洗涂片
染色
观察
(8%HCl,能改变细胞膜的通透性,同时使DNA与蛋白质分离)
(蒸馏水)
(%的NaCl)
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【方法步骤】
(一)取口腔上皮细胞制片
1、在洁净的载玻片上,%的NaCl溶液(维持口腔上皮细胞的正常形态)。
2、用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻地刮几下,把牙签上附有碎屑的一端,放在上述载玻片上的液滴中涂抹几下。
3、点燃酒精灯,将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干。
(二)水解
1、在小烧杯中加入30mL质量分数为8%的盐酸,将烘干的载玻片放入小烧杯中。
2、在大烧杯中加入30℃温水。
3、将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温5min。
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【方法步骤】
1、用低倍显微镜观察:选择染色均匀、色泽浅的区域,移至视野中央,将物象调节清晰。
2、换用高倍显微镜观察,调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况。
用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s。
(四)染色
1、用吸水纸吸去载玻片上的水分。
2、将吡罗红***绿染色剂滴2滴在载玻片上,染色5min。
3、吸去多余染色剂,盖上盖玻片。
(三)冲洗涂片
(五)观察
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【方法步骤】
真核细胞的DNA主要分布于细胞核中。
线粒体、叶绿体内也含有少量的DNA。
RNA主要分布在细胞质中。
五、实验结论
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【注意事项】
①选用的实验材料既要容易获得,又要便于观察; ②常用的观察材料有人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞(为避免原有颜色的干扰,不可使用紫色表皮细胞)
①取口腔上皮细胞之前,应先漱口,以避免装片中出现太多的杂质; ②取洋葱表皮细胞时,尽量避免材料上带有叶肉组织细胞
,切忌直接用水龙头冲洗。
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