文档介绍：HPLC法测定劳门十三味散中羟基红花黄色素A的含量
殷乐(内蒙古鄂尔多斯市药品检验所东胜 017000)
摘要目的:建立劳门十三味散中羟基红花黄色素A的含量测定。方法:选用高效液相色谱法。结果:~ (r=),%,%。结论:本法可作为劳门十三味散中羟基红花黄色素A含量测定的一种准确、灵敏、可行的方法。
关键词 HPLC法;劳门十三味散;羟基红花黄色素A;含量测定
劳门十三味散为经过多年临床实践的传统蒙药验方,由天竹黄、丁香、紫檀香、甘松、甘草、木香、紫草茸、红花、檀香等十三味药组成。主要用于清热、解毒、润肺。处方中红花的黄色素和红色素成分由黄酮类化合物组成,水溶性黄色素的主要成分包括红花黄色素A、B、C,近来年的研究还发现了羟基化的红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A)为主要成分[1]。标准制定过程中,以羟基红花黄色素A作为测定指标,采用高效液相色谱法对本品中的红花建立了含量测定方法。通过实验摸索,确定了比较理想的色谱条件,并经过方法学考察及阴性对照实验,表明该方法操作简单,重现性好,专属性强,方中其它组分对羟基红花黄色素A的测定无干扰,故认为可作为劳门十三味散含量测定方法。

:岛津LC-10AT泵、岛津SPD-10A检测器、岛津CLASS-VP色谱工作站。岛津uv-1700型紫外分光光度仪。Sartorius BP211D型电子分析天平、Precisa 92SM-202A型电子分析天平。
:羟基红花黄色素A对照品(批号111637-200503),中国药品生物制品检定所提供;劳门十三味散供试品三批(批号分别为20060
19、2006042、2006060),由阿拉善盟蒙医院提供;甲醇、乙腈为色谱纯,水为高纯水,其它试剂均为分析纯。

:色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶,本实验研究采用Phenomenex C18柱(250mm×,5μm)及Kromasil ODS柱(250mm×,5μm)。
:参照《中国药典》2005年版一部“红花”项下的流动相比例进行流动相条件摸索,样品保留时间太短,经调整流动相比例为甲醇-乙腈-%磷酸溶液(±)(26∶2∶72),羟基红花黄色素A峰与其它成分达到较好的分离度,并具合适的保留时间,并解决了拖尾现象,故采用上述流动相。
:采用40℃柱温,可降低流动相粘度,降低柱压,故将柱温定为40℃。
:取羟基红花黄色素A对照品溶液,于紫外可见分光光度仪上,自200nm~700nm做光谱扫描,羟基红花黄色素A在波长402nm与226nm处有最大吸收,结合《中国药典》2005年版一部“红花”项下的规定,选用403nm作为检测波长。
:对多批供试品测定结果表明,羟基红花黄色素A峰的理论板数在3000以上即能达到与相邻峰分开,并符合《中国药典》规定R>,故本标准规定理论板数按羟基红花黄色素A峰计不得低于3000。
:参