文档介绍：薆实验一、MS液体成份的配制莅一、实验目的:螁1、掌握植物组织培养常用MS液体培养基成份的配制;蚈2、为后续组培实验做好准备工作。莆二、实验基本原理膂MS培养基是Murashige和Skoog(二人缩写)于1962年为烟草细胞培养设计的,其特点是无机盐和离子浓度较高,其养分的数量和比例合适,是较稳定的离子平衡溶液,能满足植物细胞的营养和生理需要,适用范围比较广,多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。膃三、实验仪器与与试剂肈1、实验仪器:肇1000ml/500ml量筒4个、250ml三角瓶(每人2个)、1000ml烧杯或塑料量杯5个、1000ml试剂瓶5个、10只100mL试剂瓶、微波炉、10ml离心管15个、玻璃棒5个、电子天平、称量纸、卷纸、移液枪(1000µL、100µL)、药勺。芄2、实验试剂:芁见下述实验方案中所列。螁四、实验方案与操作螇1、大量元素20X母液配制(贮备液I)莅配制20X(倍)浓度大量元素母液1000mL,按顺序充分溶解后再加后一个试剂。莀KNO3 1900mg/L()膀NH4NO3 1650mg/L()薇KH2PO4 170mg/L() 370mg/L() 440mg/L()(可单独瓶配制存放)蚀2、微量元素100X母液(贮备液II)配制:芈配制100X(倍)浓度大量元素母液1000mL,按顺序充分溶解后再加后一个试剂。膄 KI (先配母液:)袀 H3BO3 (先配母液:)聿 (先配母液:)肈 (先配母液:)芅 (先配母液:)芃 (先配母液:)蒈 (先配母液:)螈3、铁盐100X母液(贮备液III)肃配制100X(倍)浓度大量元素母液1000mL,按顺序充分溶解后再加后一个试剂。莁 、有机成分100X母液(贮备液IV)肄配制100X(倍)浓度大量元素母液1000mL,按顺序充分溶解后再加后一个试剂。葿 肌醇 100mg/L莇 甘氨酸 2mg/L(先配母液:)羅 盐酸硫***素(VB1) (先配母液:)膅 盐酸吡哆醇(VB6) (先配母液:)袂 烟酸(VB5) (先配母液:)肁5、植物生长调节剂的配制:螆6-BA(1mg/mL):称10mg6-BA先溶于1mL1M盐酸充分溶解,再加9mL以蒸馏水,混匀。羃NAA(1mg/mL):称10mgNAA先溶于1mL95%乙醇充分溶解,再加9mL以蒸馏水,混匀。羀五、实验注意事项蒀1、配制贮存母液时,要算好各种成分逐次加入,等第一种成分完全溶解后再加入第二种成分,切忌“一锅煮”。有机物质配好以后要装入棕色瓶放入电冰箱内保存,其它三种母液可在常温下保存但最多不能超过一个月;蒆2、pH值对培养基的硬度有影响,pH过高培养基变硬,pH过低培养基不能凝固,所以要调整好培养基的pH值;羄六、作业:认真总结,完成本实验报告。莃衿芆肆实验二、MS固体培养基的配制与灭菌蒁一、实验目的艿1、掌握植物组织培养常用MS固体培养基的配制和灭菌方法;羇2、为下次组培实验做好准备工作。袃二、实验仪器与试剂袃1、实验仪器螈高压灭菌锅、微波炉、100-200个组培瓶、pH试纸、4个1000mL量筒、4个1000mL塑料量杯、4只玻璃棒、移液枪(1000µL、100µL)、称量纸、卷纸、电子天平、药勺螇2、实验试剂:10%NaOH、1MHCl、蔗糖,琼脂袄羂三、实验操作步骤***1、在1000mL塑料量杯中,先加入800mL双蒸水,再按比例依次加入下列MS成份:蒇大量元素20X母液:微量元素100X母液、铁盐100X母液、有机成份100X母液羆50mL10mL10mL10mL肀最后再用约双蒸水(约120mL)定容到1000mL,充分混匀。静置30min,观察无沉淀方可用。袁2、称取并继续加入蔗糖30g,,混匀。膈3、用10%(用pH试纸或pH计测试),混匀。螃4、在微波炉中加热至溶液均一、稳定(要补充蒸发的水)。蒃5、将配好的MS培养基趁热迅速分装至三角瓶或