文档介绍：细菌遗传学与基因工程
第一节 DNA的重组和重组DNA技术
第二节重组DNA技术的基本操作程序
第三节转座因子
第四节文库构建与酵母双杂
第一节 DNA的重组和重组DNA技术
一、重组DNA技术发展史上的重大事件
二、重组DNA技术的主要内容或步骤
三、重组DNA技术的主要技术原理
(Agarose & Polyacrylamide)
(site-directed mutagenesis)
5. 限制性核酸内切酶——“分子手术刀”
——“分子缝合针”
——“分子运输车”
Section 1 DNA bination
DNA分子内或分子间发生的遗传信息的重新共价组合过程。
包括同源重组、特异位点重组和转座重组等类型,广泛存在于各类生物。
体外通过人工DNA重组可获得重组体DNA,是基因工程中的关键步骤。
Section 1 bination DNA technical
name
Gene Splicing / DNA bination
operating environment
In vitro (细胞体外)
Manipulate objects
gene
Operational level
Molecular DNA
Basic process
剪切→拼接→导入→表达
result
人类需要的基因产物
一、重组DNA技术发展史上的重大事件
40年代确定了遗传信息的携带者,即基因的分子载体是DNA而不是蛋白质,解决了遗传的物质基础问题;
50年代提示了DNA分子的双螺旋结构模型和半保留复制机制,解决了基因的自我复制和世代交替问题;
50年代末至60年代,相继提出了"中心法则"和操纵子学说,成功地破译了遗传密码,充分认识了遗传信息的流动和表达。
年份事件
1869 F Miescher首次从莱茵河鲑鱼精子中分离DNA。
1944 . Avery证实DNA是遗传物质。
1952 . 。
1953 。-射线衍射法证实了这一结构。
1957 。
1958 M. Meselson和F. W. Stahl提出了DNA的半保留复制模型。
1959-1960 S. Ochoa发现RNA聚合酶和信使RNA,并证明mRNA决定了蛋白质分子中的氨基酸序列。
1961 Nirenberg破译了第一相遗传密码;F. Jacob和J. Monod提出了调节基因表达的操纵子模型。
年份事件
1964 C. Yanofsky和S. Brenner等人证明,多肽链上的氨基酸序列与该基因中的核苷酸序列存在着共线性关系。
1965 S. W. Holley完成了酵母丙氨酸tRNA的全序列测定;科学家证明细菌的抗药性通常由"质粒"DNA所决定。
1966 ,、、。
1970 ,。。
1972-1973 ,,于72年获得第一个重组DNA分子,73年完成第一例细菌基因克隆。
1975-1977 、。1977年完成了全长5387bp的噬菌体φ174基因组测定。
年份事件
1978 首次在大肠杆菌中生产由人工合成基因表达的人脑激素和人胰岛素。
1980 美国联邦最高法院裁定微生物基因工程可以专利化。
1981 R. D. Palmiter和R. L. Brinster获得转基因小鼠;A. C. Spradling和G. M. Rubin得到转基因果蝇。
1982 美、英批准使用第一例基因工程药物--胰岛素;Sanger等人完成了入噬菌体48,502bp全序列测定。
1983 获得第一例转基因植物。
1984 斯坦福大学获得关于重组DNA的专利。
年份事件
1986 GMO首次在环境中释放。
1988 J. D. Watson出任"人类基因组计划"首席科学家。
1992 欧共体35个实验室联合完成酵母第三染色体全序列测定(315kb)
1994 第一批基因工程西红柿在美国上市。
199