文档介绍：基因芯片技术筛选辛伐他汀作用K562细胞的差异表达基因
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STRONG【关键词】/STRONGK562细胞辛伐他汀基因芯片
研究证实辛伐他汀能抑制慢性粒细胞白血病细胞增殖并诱导其凋亡,,以探讨其作用机制.
STRONG 1材料和方法/STRONG
辛伐他汀购自中国药品生物制品检定所,K562细胞购自四川大学华西免疫室,基因芯片检测由北京博奥完成.
,提取总RNA,以Cy3,Cy5为荧光染料,按照文献[1]制备荧光标记cDNA,等量混合处理组和对照组荧光标记cDNA,与芯片杂交后洗涤,激光扫描仪扫描芯片,分析差异表达基因,取四张芯片共同的差异表达基因作为本次实验的结果.
PCR验证差异表达基因随机选取芯片结果中有差异表达的基因AXUD1,TNFRSF9,以βactin为内对照,分别用对照组和处理组cDNA为模板,采用定量RTPCR对芯片结果进行验证.
STRONG 2结果/STRONG
,~,>,,基因芯片检测发现共有176条基因表达发生明显改变,,25条基因表达下调,(略)
PCR结果表明,处理组K562细胞中AXUD1,TNFRSF9的相对含量较对照组显著增加,,表明定量RT
PCR验证的基因表达变化趋势与表达谱芯片的结果相吻合.
/DL
:S100钙结合蛋白P;ILK:整和素连接激酶;SKP2:S期激酶相关蛋白2(p45);CDKN1A:细胞周期素依赖激酶抑制剂1A(p21);DDIT3:DNA损伤诱导转录因子3;TNFAIP3:肿瘤坏死因子诱导蛋白3;MIPEP:线粒体中间肽酶;AXUD1:AXIN1上调蛋白;DUSP1:双特异性磷酸酶1;PPP1R15A:蛋白磷酸酶1调控因子15A;SOCS1:JAK结合蛋白;TNFRSF9:肿瘤坏死因子受体超家族,成员9;TNFRSF10B:肿瘤坏死因子受体超家族,成员10B;BNIP3L:BCL2/腺病毒E1B19kD结合蛋白样.
STRONG 3讨论/STRONG
研究证实他汀类药物具有抗肿瘤作用[2-4],,研究发现辛伐他汀可抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡,,结果发现,%