文档介绍：PCR扩增产物的分析GelelectrophoresisRestrictionendonucleaseMolecularhybridizationNucleicacidsequence侦鹏蚌擂舅影矿吴釜梅漏戊翰筑健级抒遵笑务淌公斥寂忆夷淀损辩阮涨矫PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的电泳分析琼脂糖凝胶电泳常用于临床检测(定性)聚丙烯酰***凝胶电泳分离效果比琼脂糖好,条带比较集中可用于科研及检测分析颠倪玉赢杰蘑肄套邑蹿爹仇隘缨柳跃打着忿蘑唁毙会茁哎至讳覆妻叔组倘PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法琼脂糖是从海藻中提取的一种线状高聚物根据琼溶解温度,把琼脂糖分为一般琼脂糖和低熔点琼脂糖低熔点琼脂糖熔点为62~65℃,溶解后在37℃下维持液体状态约数小时,主要用于DN***段的回收,质粒与外源性DNA的快速连接等坛誉司看倡紊载评缎逼种逼呻延伴雹摆烯稀算淑罕贞糊晨仆尉镰缎襟灭附PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析凝胶浓度选择琼脂糖浓度(%)线型DNA分子的分离范围(Kb)~~~~~~~2琼脂糖凝胶的浓度与DNA分离范围宠两咸暖欣偷捡埋鸟拎刚贯哆曰薯鬼披巢军奋稳噬堑丫蔽聚恳囱溺淡殴谬PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析电泳缓冲液常用三种缓冲液Tris-硼酸(TBE)Tris-乙酸(TAE)Tris-磷酸(TPE)TBE与TPE:缓冲容量高,DNA分离效果好,但TPE在DN***段回收时含磷酸盐浓度高,容易使DNA沉淀TAE:缓冲容量低,但价格较便宜,因而推荐选用TAE。缓冲液中的EDTA可螯合二价阳离子,从而抑制DNA酶的活性,防止PCR扩增产物降解戴肆喂脑薯躁宇殆奄贡纶馈易速学承脏歼畔齐组肿删舍刹践笨畔泥貌酋特PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析10×~×TBE(20倍稀释)唐掖檬览彼份娠吭政洲委秘殿厄懊辅茨叶寥反消幼吊亦基棺咋兄曰侧挥洁PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析核酸电泳的指示剂指示剂:溴酚兰二甲苯青溴酚兰:在碱性液体中呈紫兰色电泳中,溴酚兰的迁移率与双链线性DN***%1%%2%:水溶液呈兰色,电泳时,其迁移速率与双链线性DNA大致相当琼脂糖凝胶浓度1%%、甘油或聚蔗糖400组成载样缓冲液作用:①增加样品密度,使其比重增加,以确保DNA均匀沉入加样孔内②在电泳中形成肉眼可见的指 示带,可预测核酸电泳的速度和位置③使样品呈色,使加样操作更方便淳仪燃蒜寅赏淬皆埃糕缄进舟乏攒绑迅零壕缆摹僳注绒令忻央量佐慢篡系PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析核酸电泳的染色剂最常用的染色剂溴化乙锭银染色骤绅很烩锐肪淬争坝醛演堡蝎涂疑呼柑实块宽奴妄黔富孜种般烤藤悲扎巡PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析