文档介绍：沙门菌检验
严纪文
沙门菌概况
沙门菌是1885年由Salmon氏等在猪霍乱流行时,分离出的猪霍乱沙门菌,由于Salmon氏对本属细菌的发现贡献卓越,故定名为沙门菌属。
沙门菌属是肠杆菌科中最重要的病原菌。它是一群抗原结构、生化特性相似的革兰氏阴性杆菌。血清型繁多,目前已发现的沙氏菌有2500多个血清型和变种。我国自1911年至90年代初已有255个血清型。
虽然沙门菌的血清型很多,但多数国家从人体、动物和食品中分离出沙门菌仅约40~50个血清型。而在一个国家中的一定时期只约有10个血清型是比较常见的。
分类:
伤寒沙门菌(伤寒、副伤寒)-传染病防治法中规定报告的乙类传染病。
非伤寒沙门菌-食品卫生标准的检测的主要对象。
沙门菌的生物学特性
形态与染色性:
革兰氏阴性杆菌,无芽胞,一般无荚膜。
除鸡瘟沙门菌()和鸡沙门菌()外均有动力。为周身鞭毛,并多数有菌毛。
大小:1~3um×~1um。
营养需求不高,需氧或兼性厌氧。普通营养培养基上均能生长,能够利用柠檬酸盐作为碳源。
在普通肠道选择性平板上基本上形成无色菌落。菌落中等大小,半透明,表面光滑,边缘整齐或呈锯齿状。
不分解乳糖,大部分菌株产H2S,发酵葡萄糖产酸不产气。
培养与生化特性
最适培养温度为37℃,最适pH ~。
耐受胆盐,在粪便、土壤、食品、水中可生存5个月至二年之久。
沙门菌的分布
沙门菌广泛存在于自然环境中。
通过沙门菌病患者或健康带菌的人和动物的排泄物污染环境和食品。
易于污染的高危食物:畜禽肉类、蛋、奶及其制品。
沙门菌在肉类中不分解蛋白质,不产生靛基质,所以当食品污染了沙门菌后,通常没有感官性状的改变。
修订内容
前增菌:取消样品分类,前增菌液统一为“缓冲蛋白胨水”。
对所有样品均进行8~18h前增菌。原标准只对冻肉、蛋品、乳品等加工食品进行前增菌。
修改了样品的处理方式:增加拍击式均质器,均质袋可直接培养。
样品液增加调整pH值。
选择性增菌:使用“TTB、SC”,取消“MM”。
分离培养基:使用BS、XLD、HE、科玛嘉显色培养基。取消DHL、SS。
生化鉴定:
20E或Vitek GNI为传统生化鉴定方法的选择性替代方法。
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原国标中生化鉴定是将可疑菌落同时接种于三糖铁(TSI)琼脂、蛋白胨水(供做靛基质试验)、尿素琼脂()、氰化钾(KCN) 培养基和赖氨酸脱羧酶试验培养基;
现修改为:在接种TSI琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的同时增加一项营养琼脂(NA),经TSI琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的选择后,可筛掉大部分非沙门氏菌株,大大减少了工作量,同时也满足了API 20E或 Vitek GNI鉴定的需要。
为保持与原标准的一致性,新标准也保留了可以同时直接接种蛋白胨水(供做靛基质试验)、尿素琼脂()、KCN 培养基的内容。本部分还增加了对疑似菌落进行留样确认的部分,以备必要时复查,这对生化鉴定不确定的菌落进行进一步验证是非常必要的。
血清学鉴定中的菌体分群改为选择性试验项目。
报告:综合以上生化试验和血清学鉴定的结果,报告25g样品中检出或未检出沙门菌。