文档介绍:MicroRNA let-7C 在肝细胞癌中的表达及其临床意义
吴福生朱秀明吴灵娇
浙江大学医学院附属第一医院
2011年CSCO年会厦门
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☆原发性肝细胞癌是一种高度恶性的肿瘤,每年超过
60万人死于本病,,其中55%
发生在中国。
☆当前诊断肝癌的生物标志物主要是甲胎蛋白(AFP),
但仍有30%患者AFP阴性或低度阳性。
☆肝癌术后5年生存率仅为30% ~40%。
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因此,早期诊断一直是肿瘤学研究的热点,那么探索肿瘤早期生物标志物则为一个良好的选择。
又一个AFP???
早期发现、早期治疗是提高肝癌生存期的关键!
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近年来,越来越多疾病的miRNA表达谱已被确立,通过与正常表达谱的对比证实了miRNA与人类重大疾病(如:肿瘤、艾滋病、心血管系统疾病、神经系统疾病、糖尿病等)的发生发展存在相关。
微小RNA(miRNA)是一类进化上保守的长度约21-25个核苷酸的非编码单链小分子RNA。
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Let-7miRNA是目前研究最为广泛的miRNA之一,其在肺癌,直肠癌等的研究中,let-7被证明是一个抑癌因子。
但到目前为止,let-7与肝癌的诸多临床病理特征的关系很少研究。
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本文通过Real time-PCR方法检测了32例肝细胞肝癌中的let-7c的表达,分析其与临床病理特征的关系,探讨let-7C在肝细胞肝癌中的作用。
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一、材料与方法
※32例标本取自浙江大学医学院附属第一医院肿瘤外科
。
※标本均经过病理科医师证实为肝细胞肝癌。
※肝癌标本取自病灶中央无坏死部分,另取距肿瘤边缘大
于3cm的癌旁非肿瘤组织,离体后立即切成小块,于
10min中内放于液氮中保存,后转存于-80℃冰箱。
※标本的获得均取得患者本人及其家属的同意。
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男性20例,女性12例。患者年龄在28岁到69岁之间,中位年龄50岁。具体临床病理资料如表1所示。
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标本号
性别
年龄
HBV
肝硬化
AFP
大小
数目
分化
包膜
PVTT
01
2
2
1
1
1
2
1
2
1
1
02
1
1
1
2
2
1
1
1
2
2
03
1
2
1
1
2
1
1
1
1
2
04
1
1
1
2
1
1
2
1
2
2
..................
30
2
1
1
2
1
1
1
1
1
2
31
2
1
1
2
1
2
1
1
1
1
32
1
2
1
1
2
1
1
2
2
2
表1 . 32例肝癌患者临床病理资料
性别:1男性,2女性, 年龄:1≤50岁,2>50岁
HBV:1阳性,2阴性, 肝硬化:1阳性,2阴性
AFP:1阳性,2阴性, 大小:1≤5cm,2>5cm
数目:1单发,2多发, 分化:1 高、中分化,2 低分化
包膜:1阳性,2阴性, PVTT:1阳性,2阴性
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mirVana miRNA Isolation Kit(Abmion公司,美国)
TaqMan MicroRNA Reverse Transcription Ki
(Applied Biosystems公司,美国)
TaqMan Universal PCR Master Mix, No AmpErase UNG(Applied Biosystems公司,美国)
TaqMan MicroRNA Assays(has-mir-let-7c、U6 snRNA)(Applied Biosystems公司,美国)