文档介绍：磁珠法尿液基因组DNA提取试剂盒MagBeadsUrineDNAExtractionKit【目录号】UDE-5010、UDE-5030、UDE-5100【运输条件】2~25℃;【保存条件】磁珠分散液2~8℃,蛋白酶K-20℃,其它组分室温;【试剂盒组成】ponent试剂盒组成UDE-5010(100T)UDE-5030(300T)UDE-5100(1000T)【注意事项】磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心,以免磁珠受到损害,使用前务必充分混匀;蛋白酶K长期不使用,请置于-20℃保存,融化后4℃保存,并尽快使用;尿液样本应避免反复冻融,否则会导致核酸提取得量降低;本操作指南经本公司反复验证,使用前请仔细阅读,并按照操作指南建议操作。1【产品简介】本试剂盒适用于从新鲜或冷冻尿液样本中提取基因组DNA,在裂解液(UDEBufferML)环境中,基因组DNA特异性的结合于磁珠表面,经过清洗和洗脱等步骤之后,可得到高纯度的基因组DNA产物,OD260/~,OD260/,完整性好,整个操作过程简单、快速且高效。所得产物可直接用作PCR模板、杂交等下游分子生物学实验。本试剂盒可手动法在EP管中进行操作,亦可配合核酸提取仪使用,实现自动化、高通量操作。【试剂盒说明】样本类型样本量DNA提取范围浓缩尿液1mL0~15μg【自备仪器、耗材和试剂】手动版涡旋混合仪、水浴锅或金属浴、EP管()、磁力架(适用于EP管)、无水乙醇、异丙醇、磷酸缓冲盐溶液()。仪器自动版涡旋混合仪、水浴锅或金属浴、核酸提取仪、96孔方孔圆底板、EP管()、无水乙醇、异丙醇,磷酸缓冲盐溶液()。【手动版操作步骤】~,室温、5000rpm离心10min,吸弃上清液至剩余约1mL液体;,室温、10000rpm离心2min,吸弃上清液;向EP管中加入500μLPBS溶液,颠倒混匀3次,室温、10000rpm离心2min,吸弃上清液。尿样裂解向EP管中加入400μL裂解液和20μL蛋白酶K,涡旋振荡充分混匀内容物。置于58℃环境中裂解35min,每隔5min颠倒混匀一次。核酸与磁珠结合向裂解完毕EP管中加入75μL磁珠悬浮液(提前摇匀)和400μL异丙醇,涡旋振荡10min。2磁性分离将EP管置于磁力架上静置约20s至磁珠吸附完全,如EP管内盖有残留磁珠,可保持EP管在磁力架上,上下颠倒2~3次,磁珠可完全被磁力架吸附。保持EP管于磁力架上,吸弃上清液,期间避免接触磁珠。清洗1向EP管中加入600μL清洗液1,将EP管从磁力架上取下,剧烈震摇或吹打使磁珠充分分散,涡旋震荡2min,磁性分离(参照步骤4操作)。注:若磁珠出现团聚现象,为DNA含量多引起,不影响核酸提取效果。清洗2使用600μL80%乙醇,参照步骤5操作2次。干燥除醇将清洗完毕并除尽上清液后的EP管置于磁力架上,连同磁