文档介绍：《普通植物病理学》实****报告
11植物保护(微生物工程)1班
#### ￥￥￥￥￥￥￥￥￥￥
实****目的
通过两周的课程教学实****巩固和加深对课堂所学知识的理解,将所学的理论知识用于分析实践问题,学会灵活运用课程知识解决生产实践问题,使对知识的掌握上一个台阶。通过实际操作和训练,掌握课程实践教学大纲所规定的专业基本操作和实践技能,
主要包括:
病害标本采集方法、病害调查方法、病害田间诊断方法、不同病原类型(真菌、细菌、病毒、线虫、寄生性种子植物和非侵染性病害)的田间识别和症状观察、培养基制备、病原真菌和细菌的分离培养、线虫的分离和形态观察、病原真菌的玻片标本制作技术、病害鉴定技术、植物病害过塑标本和镜框标本制作法等。
二、实****内容与方法
(一) 植物病害标本的采集和制作及常见病害鉴定
(二) 植物病原的分离与培养
(三)植物病原真菌玻片标本制作
(四)植物病害过塑标本的制作
(五) 线虫的分离
三、实验步骤
标本采集
1、外出实****地点
(1)华农大农场
(2)华农大增城宁西基地
(3)广州白云区蔬菜地
2、采集方式与标本采集要求
(1)直接从病害植株以手、刀、剪刀提取病样。
(2)症状应具有典型性。标本应有典型的病状和病症,最好有不同阶段和不同部位的症状。这样才能使标本起到帮助人们正确识别病害的作用。
(3)真菌病害标本应采集有子实体的。对于真菌病害来说,鉴定病原物是正确诊断病害的重要条件之一,因此要求真菌病害标本必须有病菌的子实体。
(4)每种标本上的病害种类应力求单纯。如果一份标本上同时有几种病害,就会混淆视线,影响鉴定,这样就没有适用价值。
(5)采集时应进行必要的记载,以辅助标本不足。记载的内容应包括:寄主名称、发病情况、环境条件、以及采集日期、地点、采集人姓名等。
(6)寄主的鉴定也很重要,有些病害如锈病,不知道寄主是无法鉴定的。对于不认识的寄主植物。应将寄主鉴定所必需的部分,如枝、叶、花及果实等部分都采集齐全。
(7)适于干制的标本,应随采随压于标本夹中,尤其容易干燥卷缩的标本如水稻、小麦的叶片,最好立即夹在厚书本中,否则叶片失水卷缩后无法展平。
(8)柔软多汁或腐烂的标本,应用纸袋或标本纸包好,然后置于标本箱中,以免污染和挤坏标本,妨碍鉴定。
(10)黑白粉病、锈病、霜霉类标本等由于病菌孢子极易散落,所以采集时应用纸袋或标本纸包好后,再置于采集夹中或采集箱中,以免混杂妨碍鉴定。
(11)每种标本采集的数量不宜过少,以便在制作和应用中留有余地。
标本制作
(1)把适于压制的病样如植物的茎、叶以及去掉果肉的果皮等,整形后分层压在标本夹中,放一层标本纸(每层3-4张)放一层标本,并写上标签(标签内容为病害名称、采集地点、采集人姓名、采集日期)每个标本夹的总厚度以三寸左右厚为宜,用绳子将标本夹压紧。
(2)每隔一至两天就打开标本夹检查标本纸的干湿程度,及时更换较湿的标本纸。在第一次换纸时,同时将标本整形,使其达到既美观又便于观察的要求。
植物病原的分离与培养
实验前准备
(一)清洁环境:
分离工作严格说应在无菌条下进行,无菌室或无菌箱是分离不可缺少的设施。若限于条件实验只能在普通房间进行时,必须对房间进行彻底扫除,清洁环境、搞好卫生。地上多洒些水,以消除室内尘埃,分离开始前准备好一切用品,避免工作过程中频繁走动,以破坏环境带来杂菌,工作台上铺好湿毛巾,点燃酒精灯。
(二)实验材料及用品准备
1病组织材料
玉米小斑病病叶
水稻纹枯病病叶
水稻白叶枯病病叶
2用品准备
%升***溶液(广口瓶盛装);
95%酒精(广口瓶盛装);
1000ppm链霉素;
瓶装牛肉膏蛋白胨培养基;
瓶装马铃薯琼脂培养基;
此外,还有以下备品,无菌水1瓶,灭菌培养皿6付,灭菌1毫升吸管2支,解剖剪、解剖刀和镊子各1把,移植环,移植钩、酒精灯、珐琅盘和试管架各1个,毛巾1条,玻璃铅笔1支及火柴等。
实验步骤
玉米小斑病与水稻纹枯病原分离(组织分离法)
1、取样。取患玉米小斑病、水稻纹枯病的病样,分别切取材料2-3mm长的病健交界处。
2、表面消毒。将病组织用清水洗净,接着放到75%酒精里浸泡30s,%升***~1min,最后用无菌水洗3次。
3、培养。把材料放到PDA培养基上并在25℃培养箱里培养2~3天,观察结果。
(二)水稻白叶枯病原分离(稀释分离法)
1消毒:将剪下的植物组织用清水洗干净,然后用75%的酒精浸泡30秒,%的升***~1分钟,最后用无菌水洗涤3次。
2捣碎:取用一个灭菌小皿,向内滴加1~2滴无菌水,然后灭菌剪刀剪碎已洗涤好的组织,放入水中静置5-10分钟,制备