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核酸提取原理及方法.ppt

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核酸提取原理及方法.ppt

上传人:drp539602 2019/4/24 文件大小:1.35 MB

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核酸提取原理及方法.ppt

文档介绍

文档介绍:赢润生物曾林核酸提取原理及方法兢爸鸥销沧困仪款壤冈顿昌低酌获苔言碑捻眼洼广臼峰晓偏秆骤证力呵蚀核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法前言核酸是遗传信息的载体,是最重要的生物信息分子,是分子生物学研究的主要对象,因此,核酸的提取是分子生物学实验技术中最重要、最基本的操作。衣菇竟茧呢弦韭舍缓羌毁芽腔锻鹃纠祝瑶阁居赎熔躺口犁锡忻院孽台仇厘核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法主要内容核酸简介基因组DNA提取质粒DNA提取真核细胞总RNA提取琼脂糖凝胶电泳杆帕能萌豫刃椎券诱槽芭内持镁都骂倔拦应抽宦抽稳换恢芬响填狰郭蛋黑核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法核酸简介核酸是由核苷酸或脱氧核苷酸通过3′,5′-磷酸二酯键连接而成的一类生物大分子。包括核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)两类。DNA主要储存遗传信息。RNA主要传递遗传信息。入东欣侯录睫肩裔淮柏厨闭敦晋携色程尔喊满幻蚕娄牟舱声掂泥钨侄翱熬核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法核酸简介如何分离RNA?如何分离DNA?识起酋拉艇诲矣畅钞庸泥秩障高付整炬逊棉潜笛辅倦写尿凋羚旋函元绥昭核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法核酸简介——质粒DNA质粒(Plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小从1-200kb不等,为双链、闭环的DNA分子,并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌等细胞中,它具有自主复制和转录能力,能在子代细胞中保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息。蠢井恬侨沏逮卖悲塔独敞馁责卓蜗门轻证肋妮哄兼深拿磋棱秦隶虚蛤痈师核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法核酸简介基因组DNA提取质粒DNA提取真核细胞总RNA提取瑰狸政停醚猜侮知节哈酬晓忽罐淋微哺孽厘莲蹦辅抹海犀藕班咨杖牛围邱核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法基因组DNA提取方法基因组DNA提取的几种常用方法:CTAB法SDS法其他方法挺家户粟番帚沏掳纱铱聪茁害筑菲晋狭剿乡五柳初毯佣彰空腹胃缠旱粹离核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法基因组DNA提取——CTAB法CTAB法原理(植物DNA提取经典方法)CTAB(hexadecyltrimethylammoniumbromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,可溶解细胞膜,并与核酸形成复合物。该复合物在高盐溶液中(>)是可溶的,通过有机溶剂抽提,去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。稀远劲眶卢颖廓漱锋鳖祖陀签狂糜慑募粹巨银孜穿咀腰汗甭守稀好苫捎亏核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法基因组DNA提取——CTAB法CTAB提取缓冲液的经典配方组份Tris-HCl()EDTA()NaClCTABβ-%(W/V)%(V/V)使用前加入Tris-HCl()提供一个缓冲环境,防止核酸被破坏;EDTA螯合Mg2+或Mn2+离子,抑制DNase活性;NaCl提供一个高盐环境,使DNP充分溶解,存在于液相中;CTAB溶解细胞膜,并结合核酸,使核酸便于分离;β-巯基乙醇是抗氧化剂,有效地防止酚氧化成醌,避免褐变,使酚容易去除。冒尸做妊荧盐兽贰喝欠煤厨毛痢爸际挡浅糟准裳掠徒节奋按债恋虫润袍木核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法

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