文档介绍：Q/KM—ZJ——2008液体洗涤剂杀菌试验规程(内部使用)2008年月日内部执行质量管理中心实验室引用标准GB15979-2002一次性使用卫生用品卫生标准QB/T2738-2005日化产品抗菌抑菌效果的评价方法QB/T2850-2007抗菌抑菌型洗涤剂4、2002年版《消毒技术规范》(中华人民共和国卫生部)5、2001年版《药品微生物学检验手册》(科技出版社)杀菌率试验规程1、试验菌、试验温度、作用时间、试液浓度试验菌种:金黄色葡萄球菌(6538),大肠杆菌(25922),白色念珠菌。试验温度:20℃±1℃。作用时间:最短不得小于30s。常规作用时间为2min、5min、10min、20min。试液浓度:中和剂鉴定用试液浓度应为正式杀菌试验最高浓度。菌悬液用量:正式杀菌试验用菌悬液的浓度、取量应与中和剂鉴定中1组、2组所用菌悬液的浓度、取量相同。2、细菌繁殖体悬液、菌片的制备程序:⑴取冻干菌种管,在无菌操作下,以毛细吸管加入适量营养肉汤,轻柔吸吹数次,使菌种融化分散。-,滴入少许菌种悬液,置37℃培养18h~24h。用接种环取第1代培养的菌悬液,划线于营养琼脂培养基平板上,于37℃培养18h~24h。挑取上述第2代培养物中典型菌落,接种于营养琼脂斜面,于37℃培养18h~24h,即为第3代培养物(放在4℃左右冰箱中保藏。每隔2-3个月移种一次,继续保藏。)。⑵取第3代~14代的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物(经18h~24h培养),-,反复吹吸,洗下菌苔。随后,,在手掌上振敲80次(力度适中,勿溅出),以使细菌悬液均匀。或从新鲜菌种斜面沾取少量菌苔,接种在适合试验菌生长的培养基中,37℃培养18h~24h(或适宜时间)。作为原菌液。(源于《药品微生物学检验手册》211页)⑶细菌繁殖体悬液应保存在4℃冰箱备用。尽量减少在室温下放置时间,以减少细菌的自然死亡。应当天使用不得过夜。回收菌数为1×104~9×104cfu/ml用PBS液配置GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》回收菌数为1×108—5×108cfu/ml用TSB营养肉汤配置—2002《消毒技术规范》、菌片的制备程序:《消毒技术规范》⑴取冻干菌种管,在无菌操作下,以毛细吸管加入适量营养肉汤,轻柔吸吹数次,使菌种融化分散。-,滴入少许菌种悬液,置37℃培养18h~24h。用接种环取第1代培养的菌悬液,划线于营养琼脂培养基平板上,于37℃培养18h~24h。挑取上述第2代培养物中典型菌落,接种于营养琼脂斜面,于37℃培养18h~24h,即为第3代培养物。⑵取第3代~14代的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物(经18h~24h培养),-,反复吹吸,洗下菌苔。随后,,在手掌上振敲80次,以使细菌悬液均匀,含菌量1×108—5×108cfu/ml。⑶用无菌镊子夹住已灭菌10mm*10mm滤纸一角,一面朝上,注入10ul菌悬液,放到无菌平板内,37℃温箱中干燥20min-30min,(或在室温自然阴干后使用)制成菌片。每个菌片回收菌落,按活菌培养计数所得结果,应为5×105—5×106cfu/片。)⑷细菌繁殖体悬液和菌片,用毕应随时保存在4℃冰箱内。尽量减少在室温下放置时间,以减少细菌的自然死亡。(应当天使用不得过夜。)3、、悬液定量法杀菌试验操作程序样品用无菌标准硬水稀释至同中和剂鉴定用试液浓度,或低于中和剂鉴定用试液浓度,制成(稀释液)试验样液。将试管按需要数量分别排列于试管架上,各组由左向右,排序、标记。配制菌悬液,浓度为1×104~9×104cfu/ml—GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》或1×108—5×108cfu/ml—2002《消毒技术规范》取杀菌试验用无菌大试管,,,混匀,置20±1℃5min,,立即开启计时器,并迅速混匀(在手掌上振摇80次)。-见《消毒技术规范》,加入到含5ml样液的试管中,立即开启计时器,并迅速混匀(在手掌上振摇80次)。-见QB/T2738-2005作用2min、5min、10min、20min,(中和剂的浓度与容量应与鉴定试验结果规定的相同)充分混匀,中和作用10min后,取样液、10