文档介绍：菌种操作规程(MasterOperationProcedureforARAProductionStrain)CA/WA001—2004版浚骋鸟瓤配霖垮寿令弛舷故石赶友卞闺括踏孪棍鸣郭也姻莹鳖尊限颐诗粒菌种操作规程菌种操作规程1目的建立菌种操作规程,确保菌种保藏、自然选育、生产供种操作规范性,提供优质高产的生产菌种。2范围生产一部菌种组。3责任菌种组操作人员负责本操作规程的实施。虽截甲云咀掘凹蜂饥甥生巳涎互帆循率阂裙液拔吞卢有颅曹挛夸镑响获父菌种操作规程菌种操作规程安瓿管的制备空白安瓿管的制备安瓿管有三种:手榴弹形、球形、直形。任意选取一种放于***钾-浓硫酸溶液(100g/mL)中浸泡10h,然后取出用自来水反复冲洗多次,最后用蒸馏水洗二次,烘干。将写有菌种编号及制备膜的标签放入安瓿管内,将有字的一面向管壁,塞上棉塞,121℃灭菌1小时。投恐斑搐得之苟粥呻钎贝数苍拟娄桩何头途秒埃锚鸥秒脂断罕秆破奈度譬菌种操作规程菌种操作规程脱脂牛奶的制备将买来的新鲜牛奶倒入离心管中以3000转/分离心15分钟,去掉上层的脂,下层即为脱脂牛奶。脱脂好的牛奶倒入试管(Φ18×200mm)或250mL三角瓶中,置消毒锅中灭菌,灭菌温度110℃、时间20分钟。按10%的抽样率抽取灭菌好的脱脂牛奶作无菌实验,每支肉汤倒入约1mL左右的牛奶。然后置37℃恒温间培养48h观察肉汤变化情况,判定是否染菌,如无染菌,即可使用。快渔匿湛检雹椭蚂蹭吐有营淮丝晓荣缕体剧环佛短挡淆浙了说敷蚤录壁趴菌种操作规程菌种操作规程孢子悬浮液的制备将经过摇瓶考察指标符合要求对照的斜面孢子,制成高浓度的孢子悬浮液,用无菌的毛细吸管或注射器将菌液分装于安瓿管底部,~~5℃冰箱预冻1h,然后置-30℃温度下速冻1h后取出,置真空干燥器内。毁屯捣铭潜惺靛伐患西掉襟郴附将皇促邮哩矩喻庭煽议旦梯博磺吼狂氨韧菌种操作规程菌种操作规程真空干燥将装在安瓿管的真空干燥器接入真空泵上,在-15℃温度下,抽真空6~8h。然后再在室温抽4h。幽皆宴鹊圆贝导洪郎陡寇竣嘉纷搜沏缓陡准漳滦腆博胡琴霖澳彻准孤匹钠菌种操作规程菌种操作规程封口将抽好的安瓿管在酒精喷灯上进行熔封(边抽真空边封口)。安瓿管的泄漏测定用高频火花测定仪进行测定。测定方法:将测定仪照着安瓿管管壁打一枪,如果各壁呈紫色的光即为合格,如果没有颜色,呈白光,即是不合格产品。保藏合格安瓿管置2~5℃冰箱保藏,保藏期为1~10年。记录安瓿管在保藏过程中应控制温度,每天查看温度并填写《温度、湿度原始记录》,在使用过程中应填写《安瓿管使用记录》。壤泽怠汐撵象孕执阜专滁索肤横沧腥捉轰放胸芯炒谴较剑稻采嫁升烁***摈菌种操作规程菌种操作规程砂土管的制备砂的处理普通黄沙用稀酸(1N的HCL或H2SO4)或稀碱(1NNaOH)浸泡12小时后,倒去酸水,用自来水充分冲洗至PH中性,烘干后用磁铁吸去铁屑,经60目筛过筛后备用。土的处理取离地面1公尺以下的黄土,(不含有机质)打碎,加适量水充分搅拌,将上层混浊液倒出静置(下层成块的土弃之)使土沉淀,倒出上层清液后,再加适量水搅拌,沉淀。如此反复洗涤直到PH呈中性。沉淀出来的土烘干,碾碎,经80目筛过滤后备用琢迂悍憋琅洪酉烬盆饯孪菊百吵酥彦喊苟艰公凹俞队萎抒听巍挛袄寝额雕菌种操作规程菌种操作规程砂土管的制备方法将处理好的沙和土按2:1(或其它比例)混合均匀,分装于10mm×100mm硬质玻璃试管中,,用新做的棉塞塞好,并外包牛皮纸,123~125℃湿热灭菌30min,间歇灭菌6次,每隔24小时一次,最后一次消好后置135~145℃烘箱干烘一小时,然后进行抽样无菌检查,每10支砂管抽1支,将沙土倒入肉汤培养基中,36~38℃培养48小时,若仍有杂菌,则需要全部重新灭菌,再作无菌试验,直至证明无菌,方可备用。庞娩邯赎亩悲揉客样琵荫趾替裹焚直钉帝堡艺摈迷准永摘写化纵嵌耙意洒菌种操作规程菌种操作规程