文档介绍：一例新城疫的实验室诊治报告
,10月18日给种鸽肌肉注射鸡I系苗1头份/只,30-40日龄肉鸽200只,但未免疫疫苗。鸽群发病2天,种禽死亡2只,%,肉鸽死亡78只,死亡率为39%,使用恩诺沙星进行治疗,但效果不明显。病鸽精神不振,食欲减退,饮水量增加,羽毛松乱无光泽,垂头缩颈,翅膀松散下垂,口鼻分泌物增多。部分鸽子还出现神经症状,如头颈扭曲,头向后仰。粪便先由黑色粒状,后转为黄绿色稀便。 2剖检病变喉头、气管分泌物增多,嗦囊内充满酸臭液体及气体,腺胃乳头有出血点,心包周围、肝表面覆盖一层黄色胶胨样物。十二指肠、小肠出血,肠系膜脱落、溃疡,盲肠扁桃体肿大出血。种鸽卵巢出血。 3实验室诊断 ,加人生理盐水制成20%的乳剂,反复冻融3次,于零下20度保存以备用。 RT-PCIZ RT-PCR结果见。 RNA提取与反转录(RT)。取制备好的病料悬液,按RNA提取试剂盒说明书进行提取,得到的RNA模板立即用于反转录。反转录体系为25微升,RNA模板16微升,引物M1 2微升,5xBuffer5微升,dNTP 2微升,,M-。置PCR仪中42℃反转录1小时,95℃5分钟,反应结束后直接使用或于零下70度保存。 PCR扩增。,混匀,2000转/分钟离心10秒,立即进行PCR扩增;同时设阴阳性对照。扩增条件为94度4分钟,94度30秒,56度50秒,72度50秒,35个循环,72度延伸5分钟,4度保存。,混匀,2000转/分钟离心10秒,立即进行PCR扩增;同时设阴阳性对照,扩增条件为94度4分钟,94度30秒,56度50秒,72度50秒,35个循环,72度延伸5分钟,4度保存。琼脂糖凝胶电泳。取PCR产物5微升,于1%琼脂糖凝胶中电泳,,,80伏30分钟,电泳完后于紫外灯下观察拍照,有460bp的