文档介绍：酶联免疫吸附法在饲料安全检测中的应用
摘要:酶联免疫吸附技术是一项先进的免疫化学测定技术,目前正愈来愈广泛地应用于饲
料安全检测,本文简要介绍了酶联免疫吸附法的原理在饲料安全检测中的运用及其试验的条件
要求。
酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)是免疫酶一种,是一项
先进的免疫化学测定技术。因其具有特异性高、敏感性强、结果易于检测,是饲料安全检测中
某些违禁药品和添加剂,有害微生物的筛检和毒素的检测,是饲料安全检测中一项新的检测技
术。
1 ELISA 的基本原理及方法类型
基本原理 EILSA 主要是基于抗原或抗体能吸附至固相载体的表面并保持其免疫活性,
抗原或抗体与酶形成的酶结合物仍保持其免疫活性和酶催化活性的基本原理。在测定时,把受
检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗
体起反应,用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其它物质分开,最后结合在固
相载体上的酶量与标本中受检物质的量有一定的比例,加入酶反应的底物后,底物被酶催化变
为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,根据颜色反应的深浅进行定性或定量
分析。
ELISA 既可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个
必要的试剂和五种常见的检测方法。
三个必要的试剂固相的抗原或抗体;酶标记的抗原或抗体;酶反应的底物。五种
常见的检测方法根据试剂的来源和样品的性状及检测的具体条件,可分为:双抗体夹心法,
主要用于检测抗原;间接法,主要用于检测抗体;竞争法,既可用于检测抗原又可用于检测抗
体;双抗原夹心法,用已知抗原检测未知抗体;中和法,检测抗体。
2 ELISA 在饲料安全检测中的应用
饲料安全检测需要在各种各样复杂基质的检样中对含量非常低的有毒害物质进行检测、定
量和鉴定,由于饲料产品本身具有的附加值低,流通快,数量大的特点,因此利用快速、便捷、
价廉、准确的检测手段进行饲料安全检测极为重要。目前在饲料安全检测中通常采用初筛(提
供某种有害物质是否存在的初步信息)——检测(即进行分离和定量分析)——确认分析(对
有疑问的有害物质提供明确的鉴定)程序来监测饲料中的有毒有害物质。 ELISA 因其具有的比
传统的检测方法灵敏度高、易于使用、较低的设备费用、快速等优点,已越来越广泛地应用于
饲料中违禁药品和添加剂的初筛,毒素的测定,和有害微生物的快速筛检。
EllSA 用于饲料中违禁药物和添加剂的初筛 2001年12月21日国家质量监督检验检疫总
局推荐英国 Radnox 公司生产的 ELISA 试剂盒为我国检测动物激素和抗生素残留的首选筛选试
剂。目前用于饲料中违禁药品和添加剂筛检的商品化试剂盒有许多,例如德国 r-Biopharm 公司,
意大利 a 及美国 Idexx 公司的产品等,它们在饲料安全检测中发挥着重要的作用。本文仅
中心以化工行业技术需求和科技进步为导向,以资源整合、技术共享为基础,分析测试、技术咨询为载
体,致力于搭建产研结合的桥梁。以“专心、专业、专注“为宗旨,致力于实现研究和应用的对接,从而推
动化工行业的发展